磷脂酶A2(PLA2)测试盒/分光光度法说明书

测定意义：
磷脂酶 A2（EC3.1.1.4）是磷脂 sn-2 位脂酰基水解酶，广泛存在于动植物组织、细菌、细胞核分泌物中，参与脂肪消化，精子成熟、细胞信号传递、脂质过氧化修复、宿主反应等生理过程，在控制体内磷脂类物质平衡、调 节 机 体 新 陈 代 谢、参 与 疾 病 的 病 理 进 程 等 方 面 发 挥 着 及 其 重 要 的 作 用。

测定原理：

磷脂酶 A2 作用于 2-硫代十六酰乙基磷酸胆碱（HEPC）产生游离巯基，与 DTNB 反应生成黄色物质，在 412nm处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器：
天平、超速冷冻离心机、研钵、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿。
试剂组成和配制：
提取液：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。
试剂一：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。
试剂二：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。
试剂三：液体×5 瓶，-20℃避光保存。临用前根据用量每瓶加入 4.5mL 试剂二充分混匀；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
样品处理：
1. 组织：按照质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g，加入 1mL 提取液）加入提取液，冰浴匀浆后于 4℃，10000g 离心 5min，取全部上清于 4℃、100000g 离心 30min，弃上清，取沉淀溶于 1mL 试剂一。
2. 细胞：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）；然后于 4℃，10000g离心 5min，取全部上清于 4℃、100000g 离心 30min，弃上清，取沉淀溶于 1mL 试剂一。
3. 血清：直接测定。
测定操作：

本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。