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磷脂酶D(PLD)测试盒/微量法
物品单位 价格 品牌
7065 联迈生物
  • 产地:上海
  • 型号:100T/96S
  • 货号:LM-876629S
  • 发布日期: 2022-11-16
  • 更新日期: 2022-11-16
产品详细说明
产地 上海
品牌 联迈生物
货号 LM-876629S
用途范围 磷脂酶D催化水解磷脂酰胆碱末端的磷脂酰二酯键生成磷脂酸和胆碱,胆碱在胆碱氧化酶催化作用下生成甜菜碱和过氧化氢,过氧化氢在过氧化氢酶的作用下将4-氨基安替比林和重蒸酚氧化成粉红色物质,在500nm处有特征吸收峰。
纯度 99%
CAS编号
规格 100T/96S
是否进口

磷脂酶D(PLD)测试盒/微量法说明书

注 意 :正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:
磷脂酶 D(EC3.1.4.4)即磷脂酰胆碱水解酶,是催化磷酸二酯键水解和碱基交换反应的一类酶的总称,广泛存在于高等动植物和细菌等多种生物体中,具有参与细胞脂质代谢、信号传导、生物膜形成的抗逆境胁等生理功能。

测定原理:

磷脂酶 D 催化水解磷脂酰胆碱末端的磷脂酰二酯键生成磷脂酸和胆碱,胆碱在胆碱氧化酶催化作用下生成甜菜碱和过氧化氢,过氧化氢在过氧化氢酶的作用下将 4-氨基安替比林和重蒸酚氧化成粉红色物质,在500nm 处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器:
天平、研钵、超速冷冻离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、恒温水浴锅、无水乙醇。
试剂组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 102mL×瓶,4℃避光保存。
试剂二:液体 3mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂三:粉剂×1 支,-20℃避光保存。临用前加 1mL 无水乙醇充分溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂四:液体 15mL×1 瓶,4℃避光保存。
标准品:液体 1mL×1 支,4℃避光保存。
酶液提取:
1. 组织:按照质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g,加入 1mL 提取液)加入提取液,冰浴匀浆后于 4℃,10000g 离心 5min,取全部上清于 4℃、100000g 离心 30min,弃上清,取沉淀溶于 1mL 试剂一。
2. 细胞:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒,总时间 3min);然后于 4℃,10000g离心 5min,取全部上清于 4℃、100000g 离心 30min,弃上清,取沉淀溶于 1mL 试剂一。
3. 血清:直接测定。
测定操作:

2022111612454424071

2022111612455720065

酶活计算公式
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
1.按照蛋白浓度计算
2022111612475824953

2022111612482958333

注意事项:
1. 显色完成后,若有沉淀,于 8000rpm,25℃离心 5min 后取上清测定。
2. 吸光值不宜超过 1,否则用试剂一将酶液进行稀释,并在计算公式中乘以稀释倍数。
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。

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