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游离胆固醇(FC)含量测试盒/分光光度法
物品单位 价格 品牌
208 联迈生物
  • 产地:上海
  • 型号:50管/48样
  • 货号:LM-876632S
  • 发布日期: 2022-11-15
  • 更新日期: 2022-11-15
产品详细说明
产地 上海
品牌 联迈生物
货号 LM-876632S
用途范围 游离胆固醇在胆固醇氧化酶作用下生成△4-胆甾烯酮和H2O2,H2O2在4-氨基安替比林和酚存在下,经过氧化物酶作用下生成红色醌类化合物,其颜色深浅与FC含量成正比。
纯度 99%
CAS编号
规格 50管/48样
是否进口

游离胆固醇(FC)含量测试盒/分光光度法说明书

注 意 :正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:
FC 是构成细胞膜的主要成分,也是合成肾上腺皮质激素、性激素、胆汁酸及维生素 D 等生理活性物质的重要原料。FC 浓度可作为脂代谢的指标。

测定原理:

FC 氧化酶催化 FC 生成△4-胆甾烯酮和 H2O2,过氧化物酶催化 H2O2、4-氨基安替比林和酚生成红色醌类化合物,在 500nm 有吸收峰,其颜色深浅与 FC 含量成正比。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、1mL 玻璃比色皿、异丙醇和蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:异丙醇 50mL(自备);
试剂二:液体 50mL×1 瓶,4℃保存;
试剂三:粉剂×1 瓶,4℃保存;
试剂四:液体 100μL×1 瓶,4℃保存;
标准品:液体 1mL×1 支,浓度为 0.5 μ mol/mL,4℃保存。
FC 的提取:
1、组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 试剂一)进行冰浴匀浆。8000g,4℃离心 10min,取上清置冰上待测。
2. 细菌、真菌:先收集 400-500 万细胞或细菌到离心管内,弃上清,加 1mL 试剂一,超声波破碎 1min(强度 20%,超声 2s,停 1s),即 FC 待测液。
3.血清(浆)样品:直接测定。
测定操作:
1. 分光光度计预热 30 min,调节波长到 500 nm,蒸馏水调零。
2.FC 工作液的配制:临用前,吸取约 0.8mL 试剂二分别加入试剂三和试剂四瓶中,充分溶解后再全部转移回试剂二瓶中,充分混匀,FC 工作液置于 37℃水浴 10min。用不完的工作液 4℃保存一周。
3. 标准管:依次在 1mL 玻璃比色皿中加入 100μL FC 标准液和 900μL FC 工作液,混匀,37℃静置 3h 后于500nm 测定 A 标准管。
4. 测定管:依次在 1mL 玻璃比色皿中加入 100μL FC 待测液和 900μL FC 工作液,混匀,37℃静置 3h 后于500nm 测定 A 测定管。
5、空白管:依次在 1mL 玻璃比色皿中加入 100μL 试剂一和 900μL FC 工作液,混匀,37℃静置 3h 后于500nm 测定 A 测定管。

注意:
1、 标准管和空白管只需测定一次。
2、若测定管产生白色浑浊,可以将待测液用异丙醇稀释 2~5 倍后测定,并在 结果乘以相应倍数。
计算公式:
1. 血清(浆)中 FC 含量计算:
FC 含量(μmol /dL)= C 标准液×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)×100mL=50×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)C 标准液:0.5μmol/mL;100 mL:1dL=100 mL。
2. 组织中 FC 含量计算:
(1)按样本蛋白浓度计算
FC 含量(μmol / mg prot)= C 标准液×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)÷Cpr = 0.5×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)÷Cpr
(2)按样本鲜重计算
FC 含量(μmol / g 鲜重)= C 标准液×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)÷W= 0.5×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)÷W
C 标准液:0.5μmol/mL;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本质量,g/mL
3. 细胞、细菌中 FC 含量计算:
FC 含量(μmol /104 cell)= C 标准液×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)÷细菌或细胞(104 cell/L)=0.5×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)÷细菌或细胞(104 cell /L)C 标准液:0.5μmol/mL。 检出限为 1nmol/mL。

本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。

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