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总胆固醇(TC)含量测试盒/分光光度法
物品单位 价格 品牌
230 联迈生物
  • 产地:上海
  • 型号:50管/48样
  • 货号:LM-876634S
  • 发布日期: 2022-11-15
  • 更新日期: 2022-11-15
产品详细说明
产地 上海
品牌 联迈生物
货号 LM-876634S
用途范围 酯酶催化胆固醇酯作用下水解成游离胆固醇(FC)和游离脂肪酸(FFA),FC在胆固醇氧化酶作用下生成△4-胆甾烯酮和H2O2,H2O2在4-氨基安替比林和酚存在下,经过氧化物酶作用下生成红色醌类化合物,其颜色深浅与TC含量成正比
纯度 99%
CAS编号
规格 50管/48样
是否进口

总胆固醇(TC)含量测试盒/分光光度法说明书

注 意 :正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:
TC 包括游离胆固醇和胆固醇酯。TC 是指组织中所有脂蛋白所含胆固醇之总和。

测定原理:

利用酯酶催化胆固醇酯水解生成游离胆固醇(FC)和游离脂肪酸(FFA),从而把胆固醇酯转化为 FC;进一步利用胆固醇氧化酶催化 FC 氧化,生成△4-胆甾烯酮和 H2O2; 利用过氧化物酶催化 H2O2氧化 4-氨基安替比林和酚,生成红色醌类化合物;在 500nm 有特征吸收峰,其颜色深浅与 TC 含量成正比。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、1mL 玻璃比色皿、异丙醇和蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:异丙醇 50mL(自备)。
试剂二:液体 50mL×1 瓶,4℃保存;
试剂三:粉剂×1 瓶,4℃保存;
试剂四:液体 100μL×1 瓶,4℃保存
TC 标准品:液体 1mL×1 支,0.5μmol/mL,4℃保存。
TC 的提取:
1、组织中 TC 的提取:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 试剂一)进行冰浴匀浆,8000g 4℃离心 10min,取上清,即 TC 待测液。
2、细胞、细菌中 TC 的提取:先收集 400-500 万细胞或细菌到离心管内,弃上清,加 1mL 试剂一,超声波破碎 1min(强度 20%,超声 2s,停 1s),即 TC 待测液。
3、血清(浆)等样品:直接测定。
测定操作:
1. 分光光度计预热 30 min,调节波长到 500 nm,蒸馏水调零。
2. TC 工作液的配制:临用前,吸取约 0.8mL 试剂二分别加入试剂三和试剂四瓶中,充分溶解后再全部转移回试剂二瓶中,充分混匀,TC 工作液置于 37℃水浴 10min。用不完的工作液 4℃保存一周。
3. 标准管:依次在 1mL 玻璃比色皿中加入 100μL FC 标准液和 900μL TC 工作液,混匀,37℃静置 3h 后于500nm 测定 A 标准管。
4. 测定管:依次在 1mL 玻璃比色皿中加入 100μL FC 待测液和 900μL TC 工作液,混匀,37℃静置 3h 后于500nm 测定 A 测定管。
5. 空白管:依次在 1mL 玻璃比色皿中加入 100μL 试剂一和 900μL TC 工作液,混匀,37℃静置 3h 后于500nm 测定 A 测定管。

注意:标准管和空白管只需测定一次。
计算公式:
1. 血清(浆)中 TC 含量:
TC(μ mol /dL)= C 标准液×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)×100= 50×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)
C 标准液:0.5μmol/mL;100 mL:1dL=100 mL。
2. 组织中 TC 含量:
(1)按样本蛋白浓度计算
TC(μ mol/mg prot)= C 标准液×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)÷Cpr = 0.5×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)÷Cpr
(2)按样本质量计算
TC(μ mol / g 鲜重)= C 标准液×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)÷W= 0.5×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)÷W
C 标准液:0.5μmol/mL;样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本质量,g/mL
3. 细胞、细菌中 TC 含量:
TC(μ mol /104 cell)= C 标准液×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)÷细菌或细胞(104 cell/L)= 0.5×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)÷细菌或细胞(104 cell /L)
C 标准液:0.5μmol/mL。
注意事项:
检出限为 1nmol/mL。

本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。

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