甘油三酯(TG)含量测试盒/分光光度法说明书

测定意义：
TG 是长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子，不仅是细胞膜的主要成分，也是重要呼吸底物。

测定原理：

用异丙醇提取 TG，脂蛋白酯酶水解 TG 生成甘油和脂肪酸（FFA），甘油与三磷酸腺苷在甘油激酶和磷酸甘油氧化酶催化下生成 H2O2，过氧化物酶催化过氧化氢氧化 4-氨基安替比林偶联酚，生成有色化合物，在 505 nm 处有特征吸收峰。
自备仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液枪、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水
试剂组成和配置：
试剂一：液体 60 mL×1 瓶，4℃保存。
试剂二：液体 26 mL×1 瓶，4℃保存。
试剂三：液体 26 mL×1 瓶，4℃避光保存。
TG 的提取：
1、 组织中 TG 的提取：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 试剂一）进行冰浴匀浆，8000g，4℃离心 10min，取上清，即 TG 待测液。
2、细胞、细菌中 TG 的提取：先收集 400-500 万细胞或细菌到离心管内，离心后弃上清，加 1mL 试剂一，超声波破碎 1min（强度 20％，超声 2s，停 1s），8000g，4℃离心 10min，取上清，即 TG 待测液。
3、血清（浆）样品：直接测定。
测定操作：
可见分光光度计预热 30min，调节波长到 505 nm。

混匀，室温下静置 20min，于 505 nm 波长处读取吸光值，记为 A 空白和 A 测定，△A=A 测定-A 空白。空白管只需测一管。
计算公式：
标准曲线：y = 0.6522x - 0.0199； R2 = 0.9979；x：标准品浓度（mg/mL） y：吸光值差值 ΔA。
1. 血清（浆）中甘油三酯含量计算：
TG 含量（mg/mL）=（ΔA+0.0199）÷0.6522=1.533×（ΔA+0.0199）
2. 组织、细菌或细胞中甘油三酯含量计算：
(1)按样本蛋白浓度计算
TG 含量（mg/ mg prot）= (ΔA+0.0199)÷0.6522×V 样÷(Cpr×V 样）=1.533×（ΔA+0.0199）÷Cpr
(2)按样本质量计算
TG 含量（mg/ g 鲜重）=（ΔA+0.0199）÷0.6522×V 样÷(W×V 样÷V 样总）=1.533×（ΔA+0.0199）÷ W
V 样：加入样本体积，0.01 mL；V 样总：加入试剂一体积，1 mL；W：样本质量，g；
Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL。
注意事项：
1. 试剂盒中有易挥发性物质，实验过程中需佩戴手套和口罩，试剂瓶盖打开后应该及时盖紧。
2. 检出限为 100μg/mL。

本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。