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游离脂肪酸含量(FFA)测试盒测植物组织/微量法
物品单位 价格 品牌
510 联迈生物
  • 产地:上海
  • 型号:100T/48S
  • 货号:LM-876656S
  • 发布日期: 2022-11-15
  • 更新日期: 2022-11-15
产品详细说明
产地 上海
品牌 联迈生物
货号 LM-876656S
用途范围 在弱酸性条件下,FFA与铜盐反应生成铜皂,在715nm处有特征吸收峰,在一定范围内游离脂肪酸含量与显色程度呈线性关系。
纯度 99%
CAS编号
规格 100T/48S
是否进口

游离脂肪酸含量(FFA)测试盒测植物组织/微量法说明书

注 意 :正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:
FFA 既是脂肪水解的产物,又是脂肪合成的底物。FFA 的浓度与脂类代谢、糖代谢功能有关,也可反映食物贮藏中的品质变化。


测定原理:

在弱酸性条件下,FFA 与铜盐反应生成铜皂,在 715nm 处有特征吸收峰,在一定范围内游离脂肪酸含量与显色程度呈线性关系。
自备仪器和用品:
研钵、台式离心机、震荡仪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板。
试剂组成和配制:
试剂一:液体 100mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二:液体 20mL×1 瓶,4℃保存。
试剂三:液体 20mL×1 瓶,4℃保存。
样品中 FFA 提取:
组织用蒸馏水冲洗干净后,用吸水纸吸取表面水分,捣碎后按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 试剂一)加入试剂一,震荡提取 3h,8000g,4℃离心 10min,取上清液待测。
测定操作:
1. 分光光度计/酶标仪预热 30 min,调节波长到 715 nm。
2. 对照管:取上清液 0.4mL,加 0.2mL 试剂二,充分震荡 5min,室温静置 5min,取上层 200μL 于微量石英比色皿/96 孔板,调零。
3. 测定管:取上清液 0.4mL,加 0.2mL 试剂三,充分震荡 5min,室温静置 5min,取上层 200μL 于微量石英比色皿/96 孔板,测定吸光值,记为 A。
FFA 含量计算:
a. 使用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准曲线:y=0.0075 x+ 0.0055,R2=0.994
(1)按样本蛋白浓度计算
FFA(nmol/mg prot)= (A-0.0055)÷0.0075×V1÷(V1×Cpr)=133×(A-0.0055)÷Cpr
(2)按样本质量计算
FFA(nmol/g 鲜重)= (A-0.0055)÷0.0075×V1÷(V1÷V2×W)=133×(A-0.0055)÷W

V1:加入样本体积,0.4mL;V2:提取液体积,1mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样品质量,g。
b.使用 96 孔板测定的计算公式如下
标准曲线:y=0.0038 x+ 0.0055,R2=0.994
(1)按样本蛋白浓度计算
FFA(nmol/mg prot)= (A-0.0055)÷0.0038×V1÷(V1×Cpr)=266×(A-0.0055)÷Cpr
(2)按样本质量计算
FFA(nmol/g 鲜重)= (A-0.0055)÷0.0038×V1÷(V1÷V2×W)=266×(A-0.0055)÷W
V1:加入样本体积,0.4mL;V2:提取液体积,1mL; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样品质量,g。
注意事项:
1. 蛋白含量不可直接用提取的上清液直接测定,可用蒸馏水或缓冲液或生理盐水选用本公司的 BCA 法蛋白含量测定试剂盒。
2. 检出限为 2 nmol/mL。

本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。

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