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乳酸含量(LA)测试盒/分光光度法
物品单位 价格 品牌
568 联迈生物
  • 产地:上海
  • 型号:50管/24样
  • 发布日期: 2022-11-15
  • 更新日期: 2022-11-17
产品详细说明
产地 上海
品牌 联迈生物
货号 LM-876587S
用途范围 乳酸在乳酸脱氢酶的作用下生成丙酮酸,同时使NAD+还原生成NADH和H+,H+传递给PMS生成的PMSH2还原INT生成红色物质,在530nm处有特征吸收峰。
纯度 99%
CAS编号
规格 50管/24样
是否进口

乳酸含量(LA)测试盒/分光光度法说明书

注 意 :正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:
乳酸是生物体代谢过程中重要的中间产物,与糖代谢、脂类代谢、蛋白质代谢及细胞内能量代谢密切相关,乳酸含量是评估糖元代谢的和有氧代谢的重要指标。


测定原理:

乳酸在乳酸脱氢酶的作用下生成丙酮酸,同时使 NAD+还原生成 NADH 和 H+,H+传递给 PMS生成的 PMSH2 还原 INT 生成红色物质,在 530nm 处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器:
天平、研钵、离心机、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、恒温水浴锅。
试剂组成和配制:
提取液:液体 55mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二:液体 12mL×1 瓶,4℃保存。
试剂三:粉剂×1 支,-20℃避光保存。临用前加入 1.5mL 蒸馏水充分溶解。
试剂四:粉剂×1 瓶,4℃避光保存。临用前加 15mL 蒸馏水充分溶解。
试剂五:粉剂×1 支,4℃避光保存。标准品:液体 1mL×1 支,4℃保存。
显色液:临用前根据用量按照提取液(V):试剂三(V):试剂四(V):试剂五(m)=1(mL): 0.3(mL):3(mL):15(mg)的比例充分混匀。(注意:现配现用,用多少配多少,在棕色瓶中配制,试剂盒中带有 5个棕色空瓶)

样本处理:
1. 组织:按照质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g,加入 1mL提取液)加入提取液,冰浴匀浆后于 4℃,12000g 离心 10min,取上清测定。
2. 细胞:按照细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1mL 提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒,总时间 3min);于 4℃,12000g离心 10min,取上清测定。
3. 血清:直接测定。
测定操作:

2022111509014115825
充分混匀,于 37℃反应 30min,于 1mL 玻璃比色皿,蒸馏水调零,测定 530nm处吸光值,分别记为 A1,A2,A3,A4,△A 样=A2-A1;△A 标= A4-A3
注 意:标准对照管和标准测定管只需测定一次,每个样品测定管设一个样品对照管
计算公式:
1.按照蛋白含量计算:
LA 含量(μmol/mg prot)=△A 样÷△A 标×C 标÷ Cpr=2×△A 样÷△A 标÷ Cpr
2.按照样本质量计算
LA 含量(μmol/g 鲜重)=△A 样÷△A 标×C 标÷ W=2×△A 样÷△A 标÷ W
3.按照细胞数量计算
LA 含量(μmol/104 cell)=△A 样÷△A 标×C 标÷ 细胞数量=2×△A 样÷△A 标÷ 细胞数量
4.按照液体体积计算
LA 含量(μmol/mL)=△A 样÷△A 标×C 标=2×△A 样÷△A 标
C 标:标准品浓度,2mmol/L ;W:样本质量,g/mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL
注意事项:
1.若吸光值超过 2,请进行适当的稀释后再进行测定,并在计算公式中乘以稀释倍数。
2. 检出限为 1.8μmol/L。

本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。

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