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半胱氨酰亚砜裂解酶(CSL)测试盒/微量法
物品单位 价格 品牌
1200 联迈生物
  • 产地:上海
  • 型号:100T/48S
  • 货号:LM-892751S
  • 发布日期: 2022-11-14
  • 更新日期: 2022-11-14
产品详细说明
产地 上海
品牌 联迈生物
货号 LM-892751S
用途范围 CSL催化S-甲基-L-半胱氨酸亚砜反应产生丙酮酸,与2,4-二硝基苯肼反应,在碱性条件下显棕红色,在510nm下有特征吸收峰。
纯度 99%
CAS编号
规格 100T/48S
是否进口

半胱氨酰亚砜裂解酶(L-cysteine sulfoxide lyase, CSL)
试剂盒说明书

注 意 :正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:
半胱氨酰亚砜裂解酶(CSL)广泛存在于百合科葱属(如大蒜和洋葱),十字花科芸薹属(如卷心菜,菜花,西兰花),以及豆科中的合金欢属中,并通常被称为蒜氨酸酶(Alliinase)。香菇酸在γ-谷氨酰转肽酶和半胱氨酸亚砜裂解酶的作用下转化成香菇精,以及产生丙酮酸、乙醛、甲醛和 NH3。CSL 是内源性甲醛生成的关键酶之一,测定 CSL 活性对于研究食品安全具有重要意义。


测定原理:

CSL 催化 S-甲基-L-半胱氨酸亚砜反应产生丙酮酸,与 2,4-二硝基苯肼反应,在碱性条件下显棕红色,在510nm 下有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器:
天平、研钵、离心机、酶标仪、96 孔板、恒温水浴锅、蒸馏水。
试剂组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:粉剂×1 瓶,4℃避光保存,临用前加入 2mL 水溶解,用不完的试剂分装后-20℃保存;
试剂二:粉剂×1 瓶,-20℃避光保存,临用前加入 10mL 水溶解,用不完的试剂分装后-20℃保存;
试剂三:液体 15mL×1 瓶,4℃保存。
试剂四:液体 6mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂五:液体 30mL×1 瓶,4℃保存。
样本处理:
按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液),进行冰浴匀浆,4℃浸提 40min。12000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。 
测定操作:

2022111408375338042

2022111408380255055

计算公式:
标准曲线:y = 0.7313x + 0.0027,R2 = 0.9993;x 为标准品浓度:μmol/mL;y 为吸光度△A
1. 按蛋白含量计算
C-S lyase 活性(μmol/min/mg prot)=(△A -0.0027)÷ 0.7313×V 样÷(V 样×Cpr )÷T =0.068×(△A-0.0027)÷ Cpr
2. 按照样本质量计算
C-S lyase 活性(μmol/min/g 鲜重)=(△A -0.0027)÷ 0.7313×V 样÷(V 样÷V 样总×W )÷T =0.068×(△A-0.0027)÷ W
V 样,加入样本上清体积,0.05mL;V 样总:加入提取液体积,1mL;Cpr:蛋白浓度,mg/mL;W:样本质量,g;T,反应时间,20min。
注意事项:
1. 若测定结果中吸光值超过 1,请将样本稀释后进行测定,并在计算公式中乘以稀释倍数。香菇类样本
活性较大,可能需要稀释 80-100 倍。

本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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