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赖氨酸(LYS)测试盒/微量法
物品单位 价格 品牌
970 联迈生物
  • 产地:上海
  • 型号:100管/96样
  • 货号:LM-876503S
  • 发布日期: 2022-11-14
  • 更新日期: 2022-11-14
产品详细说明
产地 上海
品牌 联迈生物
货号 LM-876503S
用途范围 蛋白质中的赖氨酸具有一个游离的ε-NH2,它与茚三酮试剂反应生成蓝紫色物质,其颜色的深浅在一定范围内与赖氨酸的含量成线性关系。亮氨酸与赖氨酸的碳原子数目相同,而且仅有—个游离氨基(ε-NH2),所以通常用亮氨酸配制标准液。
纯度 99%
CAS编号
规格 100管/96样
是否进口

赖氨酸(lysine,Lys)含量测定试剂盒说明书

注 意 :正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:
赖氨酸是人体必需氨基酸之一,能促 进 人 体 发 育、增 强 免 疫 功 能,并有提高中 枢 神 经组织功能的作用。赖氨酸为碱性必需氨基酸。由于谷物食品中的赖氨酸含量甚低,且在加工过程中易被破坏而缺乏,故称为 限制性氨基酸。

测定原理:

蛋白质中的赖氨酸具有一个游离的 ε-NH2,它与茚三酮试剂反应生成蓝紫色物质,其颜色的深浅在一定范围内与赖氨酸的含量成线性关系。亮氨酸与赖氨酸的碳原子数目相同,而且仅有—个游离氨基(ε-NH2),所以通常用亮氨酸配制标准液。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰、蒸馏水、水浴锅。
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前加入 12.5mL 试剂三充分溶解混匀;
试剂二:液体 12.5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂三:液体 15mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:60%乙醇,自备。
赖氨酸提取:
样本烘干粉碎,称取约 0.01g 样本,加入 1mL 提取液,充分匀浆。80℃水浴提取 20min,冷却后 10000g 离心 10min,取上清待测。
测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 570nm,蒸馏水调零。
2、 工作液的配制:取 10mL 试剂一与 10mL 试剂二混合摇匀,取上清备用。用不完的试剂 4℃保存。
3、 在有盖 EP 管中加入下列试剂:

2022111410173908153

混匀,取 200μL 至微量石英比色皿或 96 孔板中,于 530nm 波长处记录吸光值 A。△A=A 测定管-A 空白管。空白管只要做一管。

赖氨酸含量计算:
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准条件下测定回归方程为 y = 0.0062x - 0.0212;x 为赖氨酸含量(μg/mL),y 为吸光值。
1.按照蛋白浓度计算
赖氨酸含量(μg/mg prot)=[(△A +0.0212)÷0.0062×V1]÷(Cpr ×V1)×1.1515=185.73×(△A+0.0212) ÷Cpr
2.按照样本质量计算
赖氨酸含量(μg/g 干重)=[(△A +0.0212)÷0.0062×V1]÷(W ×V1÷V2)×1.1515=185.73×(△A+0.0212) ÷W
V1:加入反应体系中样本体积,0.1mL;V2:加入提取液体积,1 mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;1.1515,校正系数。
b.用 96 孔板测定的计算公式如下
标准条件下测定回归方程为 y = 0.0031x - 0.0212;x 为赖氨酸含量(μg/mL),y 为吸光值。
1.按照蛋白浓度计算
赖氨酸含量(μg/mg prot)=[(△A +0.0212)÷0.0031×V1]÷(Cpr ×V1)×1.1515=371.45×(△A+0.0212) ÷Cpr
2.按照样本质量计算
赖氨酸含量(μg/g 干重)= [(△A +0.0212)÷0.0031×V1]÷(W ×V1÷V2)×1.1515=371.45×(△A+0.0212) ÷W
V1:加入反应体系中样本体积,0.1mL;V2:加入提取液体积,1 mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;1.1515,校正系数。
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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