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硫氧还蛋白过氧化物酶(TPX)测试盒/微量法
物品单位 价格 品牌
338 联迈生物
  • 产地:上海
  • 型号:100T/96S
  • 货号:LM-876380S
  • 发布日期: 2022-11-09
  • 更新日期: 2022-11-09
产品详细说明
产地 上海
品牌 联迈生物
货号 LM-876380S
用途范围 TPX催化H2O2氧化二硫苏糖醇(DTT),H2O2的吸收波长为240nm,通过测定240nm吸光度的下降速率,通过对照减去过氧化氢酶(CAT)催化分解的H2O2,即可计算出TPX活性。因此,本试剂盒可以同时测定样品TPX和CAT活性。
纯度 99%
CAS编号
规格 100T/96S
是否进口

硫氧还蛋白过氧化物酶(TPX)活性测定试剂盒说明书

注 意 :正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:
TPX 属于过氧化物酶家族,在体内主要通过还原过氧化氢和一些氢过氧化物来实现抗氧化作用,功能与 GPX 类似,也是谷胱甘肽氧化还原循环关键酶之一。TPX 普遍存在于各种生物体内,如酵母、植物、动物、原生动物、寄生虫、细菌和古细菌,在进化上高度保守。 TPX 与细胞增殖、分化、细胞凋亡及肿 瘤发生调控密切相关。TPX 的主要功能包括细胞脱毒、抗氧化和调节由过氧化氢介导的信号转导和免疫反应。


测定原理:

TPX 催化 H2O2 氧化二硫苏糖醇(DTT),H2O2 的吸收波长为 240nm,通过测定 240nm 吸光度的下降速率,即可计算出 TPX 活性。

自备仪器和用品:
低温离心机、水浴锅、可调节移液器、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板(UV 板)、和蒸馏水

试剂组成和配制:
试剂一:液体 120mL×1 瓶,室温保存。
试剂二:液体 20mL×1 瓶,- 20℃保存。
试剂三:液体 2mL×1 支,4℃。

粗酶液提取:
1. 组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 试剂一)进行冰浴匀浆。8000g,4℃离心 10min,取上清置冰上待测。
2. 细菌、真菌:按照细胞数量(104 个):试剂一体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500万细胞加入 1mL 试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒,总时间 3min);然后 8000g,4℃,离心 10min,取上清置于冰上待测。
3. 血清等液体:直接测定。
TPX 测定操作:
取微量石英比色皿或 96 孔板,加入 4 μL 上清液,180 μL 试剂二,16 μL 试剂三,迅速混匀后于240 nm 测定 10s 和 130s 吸光度,记为 A1 和 A2。
TPX 活性计算公式:
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下
(1). 按蛋白浓度计算

活性单位定义:25℃或者 37℃中,每毫克蛋白每分钟催化 1nmol H2O2 降解为 1 个酶活单位。TPX(nmol/min /mg prot)=(A1-A2)÷ε÷d×V 反总÷(Cpr×V 样)÷T=573×(A1-A2)÷Cpr
(2). 按样本质量计算
活性单位定义:25℃或者 37℃中,每克样本每分钟催化 1nmol H2O2 降解为 1 个酶活单位。 TPX活性(nmol/min/g 鲜重)=(A1-A2)÷ε÷d×V 反总÷(W×V 样÷V 样总)÷T=573×(A1-A2)÷W
(3)按细胞数量计算
活性单位定义:25℃或者 37℃中,每 104 个细胞每分钟催化 1nmol H2O2 降解为 1 个酶活单位。

本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。

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