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果胶甲酯化程度测试盒/分光光度法
物品单位 价格 品牌
1315 联迈生物
  • 产地:上海
  • 型号:50T/48S
  • 货号:LM-892808S
  • 发布日期: 2022-11-09
  • 更新日期: 2022-11-09
产品详细说明
产地 上海
品牌 联迈生物
货号 LM-892808S
用途范围 果胶甲酯键经皂化处理后释放出甲醇,甲醇与 2,4-戊二酮反应显色,在 412nm 下测定吸光值;同时半乳糖醛酸在 70℃下与浓硫酸反应生成 5-甲酰基-2-呋喃甲酸,5-甲酰基-2-呋喃甲酸与 3,5-二甲基苯酚反应产生有色物质,在 450nm 下有最大吸光值。以甲醇生成量与半乳糖醛酸含量的比值代表果胶甲酯化程度。
纯度 99%
CAS编号
规格 50T/48S
是否进口

果胶甲酯化程度试剂盒说明书

注 意 :正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:
植物细胞壁中的果胶是植物初生细胞壁的主要成分,除了起结构支撑、物质运输等作用外,还具有抵抗逆境的作用。果胶甲酯化程度影响了细胞壁的坚韧程度及其抗性。

测定原理:
果胶甲酯键经皂化处理后释放出甲醇,甲醇与 2,4-戊二酮反应显色,在 412nm 下测定吸光值;同时半乳糖醛酸在 70℃下与浓硫酸反应生成 5-甲酰基-2-呋喃甲酸,5-甲酰基-2-呋喃甲酸与 3,5-二甲基苯酚反应产生有色物质,在 450nm 下有 吸光值。以甲醇生成量与半乳糖醛酸含量的比值代表果胶甲酯化程度。
自备实验用品及仪器:
天平、低温离心机、分光光度计、1mL 玻璃比色皿、恒温水浴锅、蒸馏水、硫酸。
试剂组成和配制:
提取液:液体 60mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 6mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二:液体 6mL×1 瓶,4℃保存。
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂四:液体 4mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂五:粉剂×1 瓶,4℃避光保存;临用前加入 32mL 试剂六充分溶解待用,用不完的试剂 4℃避光保存。
试剂六:液体 35mL×1 瓶,4℃保存。

试剂七:液体 4mL×1 瓶,4℃保存。
试剂八:液体 3mL×1 瓶,4℃避光保存。
酶液提取:
称取约 0.1g 组织,加入 1mL 蒸馏水,进行冰浴匀浆。10000g 4℃离心 10min,弃上清,留沉淀。沉淀中加入 1mL 提取液,混匀后 90℃水浴 2h,冷却至室温,10000g4℃离心 10min,取上清待测。
测定操作表
1. 甲醇生成量测定

2022110910152967343

2. 半乳糖醛酸含量测定:

2022110910154310070

计算公式
1.甲醇生成量计算
标曲为 y = 0.0596x + 0.009,R2 = 0.9997;x 为标准品浓度,μmol/mL;y 为吸光值△A1。。甲醇生成量(μmol/g 鲜重)=( A1-0.009) ÷ 0.0596÷W×V 样总=16.78×( A1-0.009)÷W
2.半乳糖醛酸含量计算
标准曲线为 y = 0.517x - 0.1746,R2 = 0.9986;x 为标准品浓度,μmol/mL;y 为吸光值△A2。半乳糖醛酸(μmol/g 鲜重)=( A2+0.1746) ÷0.517÷W×V 样总=1.93×( A2+0.1746)÷W

果胶甲酯化程度(%)=甲醇生成量÷半乳糖醛酸含量× V 样总:加入提取液体积,1mL;W,样本质量,g。

本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。

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