肌酸激酶（Creatine Kinase, CK）测定试剂盒说明书

注 意：正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
CK(EC 2.7.3.2)主要存在于心 脏、肌肉以及脑等组织中，能可逆地催化肌酸与 ATP 之间的转磷酰基反应，在能量运转、肌肉收缩和 ATP 再生中有重要作用，是临床诊断心脑疾病的一个重要指标。

测定原理：

CK 催化磷酸肌酸和 ADP 生成肌酸和 ATP，己糖激酶催化 ATP 与葡萄糖形成 6-磷酸葡萄糖，6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化 6-磷酸葡萄糖与 NADP+生成 NADPH，导致 340nm 光吸收值增加。
自备实验用品及仪器：
天平、低温离心机、恒温水浴锅、紫外分光光度计、1 mL 石英比色皿和蒸馏水。
试剂组成和配制：
提取液：液体 60mL×1 瓶，4℃保存。
试剂一：粉剂 1 瓶，4℃避光保存，使用前加 15mL 蒸馏水溶解。
试剂二：液体 15mL×1 瓶，4℃保存。
工作液：临用前根据用量将试剂一和试剂二以 1:1 混合。使用前 37℃温育 2min。
粗酶液提取：
1. 组织样本：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL提取液）进行冰浴匀浆，然后 10000g，4℃离心 15min，取上清，置冰上待测。
2. 血清样本：直接测定。
测定操作表：
1. 紫外分光光度计预热 30min，调节波长至 340nm，蒸馏水调零。
2．在 1 mL 石英比色皿中加入 200μL 样本和 300μL 蒸馏水， 加入 500μL 工作液，立即混匀，37℃下测定初始吸光值 A1 与 1min 后的吸光值 A2，ΔA＝A2-A1。
注意事项
1. 配制好的工作液 4℃稳定 7 天，请配制后尽快使用。
2. 血清的 CK 不稳定，采集样本后尽快测定，4℃避光保存可稳定 24h。
3. 样品蛋白质含量需要另外测定，可选用 BCA 蛋白含量测定试剂盒进行测定。
4. OD 值大于 0.5 可用提取液适当稀释样品，并在计算公式中相应的改变稀释倍数。
本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。