|
| 产地 | 上海 |
| 品牌 | 联迈生物 |
| 货号 | LM-876398S |
| 用途 | 多聚半乳糖醛酸酶水解果胶酸生成半乳糖醛酸，具有还原性醛基，与DNS试剂反应生成红棕色物质，在540nm有特征吸收峰，测定540nm处吸光值变化可计算得多聚半乳糖醛酸酶活性。 |
| 包装规格 | 100T/48S |
| 纯度 | 99% |
| CAS编号 | |
| 是否进口 | 否 |
多聚半乳糖醛酸酶（ploygalacturonase，PG）试剂盒说明书
注 意 ：正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
多聚半乳糖醛酸酶（EC3.2.1.15）是一种细胞壁结合蛋白，可以催化果胶分子中 α-(1,4)-聚半乳糖醛酸的裂解，参与果胶的降解，使细胞壁结构解体，导致果实软化，与果实成熟、叶和花的脱落、病原物防御，细胞伸展发育以及木质化有关，在植物抗病性和食品贮藏保鲜领域具有较高的研究价值。
测定原理：
多聚半乳糖醛酸酶水解果胶酸生成半乳糖醛酸，具有还原性醛基，与 DNS 试剂反应生成红棕色物质，在540nm 有特征吸收峰，测定 540nm 处吸光值变化可计算得多聚半乳糖醛酸酶活性。
自备实验用品及仪器：
天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、恒温水浴锅。
试剂组成和配制：
提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存。
试剂一：液体 8mL×1 瓶，4℃保存。
试剂二：液体 15mL×1 瓶，4℃避光保存。
酶液提取：
1．组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆。16000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
2．细菌、真菌：按照细胞数量（104 个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1mL 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）；然后 16000g，4℃离心 10min，取上清置于冰上待测。
3．培养液：直接检测。
测定操作表：
4. 按细胞数量计算
酶活性定义：在 40℃，pH6.0 条件下，每 104个细胞每小时分解果胶酸产生 1mg 半乳糖醛酸为一个酶活力单位（U）。
PG 活性（mg/h/104cell）=(ΔA+0.008) ÷1.9821×V 反总÷（V 样×细胞数量÷V 样总）÷T= 5.045×(ΔA+0.008)÷细胞数量
V 反总：反应总体积，0.15mL；V 样：反应中样本体积，0.03mL；V 样总：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W，样本质量，g；T：反应时间，0.5h
注意事项：
煮沸样本建议将样本在沸水中煮沸 10 分钟，以将酶 灭活。
本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
