超微量 Na+K+、Ca2+Mg2+、总 ATP 酶测试盒

注 意 ：正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定


测定原理：
ATP 酶可分解 ATP 生成 ADP 及无机磷，测定无机磷的量可判断 ATP 酶活力的高低。

0.1μmol/ml 标准磷应用液的配制：
用时将 10mmol/L 磷贮备液 100 倍稀释，即取 0.1ml 加双蒸水至 10ml。
0.02μmol/ml 磷标准液的配制：

用时将 0.1μmol/ml 磷标准液用双蒸水 5 倍稀释，即取 0.1μmol/ml 磷标准液 1ml 加双蒸水 4ml。
基质液的配制：
按试剂一︰试剂二︰试剂三=260︰80︰80 比例混合。需多少配多少，现用现配。
显色剂的配制：
用时取一瓶试剂五甲液加入一瓶已预温好试剂五乙液中，充分混匀，需提前 0.5 小时配制，2～8℃条件下至少可保存 5 天，配好的显色剂的量够做 13 个管子（如果你的样本量很少，所需的显色剂的量较少，那么你可以按试剂五中的甲液︰乙液=7︰6 的比例自行配制显色剂，需多少配多少（按比例配制显色剂时要防止磷污染， 用专用吸嘴）。
三、样本前处理：
样本处理详见说明书或本公司 -技术文章部分关于样本处理的说明。测定组织和细胞同时需要测定蛋白浓度。可用总蛋白定量测试盒（考马斯亮蓝法）或者总蛋白定量测试盒(BCA 法)进行蛋白浓度的测定。
四、操作步骤：
1、酶促反应：

2、定磷：（0.02μmol/ml 磷标准液及显色剂的配制见 页）
混匀，室温静置 5 分钟，在 636nm 处，1cm 光径，双蒸水调零，测各管吸光度值。
五、计算：
1、定义：
规定每小时每毫克组织蛋白的组织中 ATP 酶分解 ATP 产生 1μmol 无机磷的量为一个 ATP 酶活力单位。
即微摩尔磷/毫克蛋白/小时（μmolPi/mgprot/hour）。
2、公式：
测定 OD 值 ? 对照 OD
值 标准品浓度 待测样本蛋白浓度组织中ATPase活力 ? ? ? 6 * ?7.8 ** ?(U / mgprot ) 标准 OD 值 ? 空白 OD 值(0.02?mol / ml ) (mgprot / ml )
[注]：6*：定义上为每小时，实际操作为 10 分钟反应，所以必须乘以6。
7.8**：反应体系中 7.8 倍稀释

本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。