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超微量ATP酶测试盒(Na+K+、Ca2+Mg2+、T-ATP酶)(测组织、普通细胞)
物品单位 价格 品牌
520 联迈生物
  • 产地:上海
  • 型号:100管/25样
  • 货号:LM-893096S
  • 发布日期: 2022-11-09
  • 更新日期: 2022-11-09
产品详细说明
产地 上海
品牌 联迈生物
货号 LM-893096S
用途范围 ATP 酶可分解 ATP 生成 ADP 及无机磷,测定无机磷的量可判断 ATP 酶活力的高低。
纯度 99%
CAS编号
规格 100管/25样
是否进口

超微量 Na+K+、Ca2+Mg2+、总 ATP 酶测试盒

注 意 :正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定


测定原理:
ATP 酶可分解 ATP 生成 ADP 及无机磷,测定无机磷的量可判断 ATP 酶活力的高低。
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0.1μmol/ml 标准磷应用液的配制:
用时将 10mmol/L 磷贮备液 100 倍稀释,即取 0.1ml 加双蒸水至 10ml。
0.02μmol/ml 磷标准液的配制:

用时将 0.1μmol/ml 磷标准液用双蒸水 5 倍稀释,即取 0.1μmol/ml 磷标准液 1ml 加双蒸水 4ml。
基质液的配制:
按试剂一︰试剂二︰试剂三=260︰80︰80 比例混合。需多少配多少,现用现配。
显色剂的配制:
用时取一瓶试剂五甲液加入一瓶已预温好试剂五乙液中,充分混匀,需提前 0.5 小时配制,2~8℃条件下至少可保存 5 天,配好的显色剂的量够做 13 个管子(如果你的样本量很少,所需的显色剂的量较少,那么你可以按试剂五中的甲液︰乙液=7︰6 的比例自行配制显色剂,需多少配多少(按比例配制显色剂时要防止磷污染, 用专用吸嘴)。
三、样本前处理:
样本处理详见说明书或本公司 -技术文章部分关于样本处理的说明。测定组织和细胞同时需要测定蛋白浓度。可用总蛋白定量测试盒(考马斯亮蓝法)或者总蛋白定量测试盒(BCA 法)进行蛋白浓度的测定。
四、操作步骤:
1、酶促反应:

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2、定磷:(0.02μmol/ml 磷标准液及显色剂的配制见 页)
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混匀,室温静置 5 分钟,在 636nm 处,1cm 光径,双蒸水调零,测各管吸光度值。
五、计算:
1、定义:
规定每小时每毫克组织蛋白的组织中 ATP 酶分解 ATP 产生 1μmol 无机磷的量为一个 ATP 酶活力单位。
即微摩尔磷/毫克蛋白/小时(μmolPi/mgprot/hour)。
2、公式:
测定 OD 值 ? 对照 OD
值 标准品浓度 待测样本蛋白浓度组织中ATPase活力 ? ? ? 6 * ?7.8 ** ?(U / mgprot ) 标准 OD 值 ? 空白 OD 值(0.02?mol / ml ) (mgprot / ml )
[注]:6*:定义上为每小时,实际操作为 10 分钟反应,所以必须乘以6。
7.8**:反应体系中 7.8 倍稀释

本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。

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