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丙二醛(MDA)检测试剂盒(分光光度法 )
物品单位 价格 品牌
750 联迈生物
  • 产地:中国/上海
  • 型号:50T/48S/盒
  • 货号:LM-OX8006
  • 发布日期: 2019-04-08
  • 更新日期: 2022-06-14
产品详细说明
产地 中国/上海
品牌 联迈生物
货号 LM-OX8006
保存条件 4℃
用途范围 氧自由基作用于脂质的不饱和脂肪酸,生成过氧化脂质;后者逐渐分解为一系列复杂的化合物,其中包括MDA。通过检测MDA的水平即可检测脂质氧化的水平。
纯度 99%
CAS编号
规格 50T/48S/盒
保质期 1年
是否进口

丙二醛(malondialdehydeMDA)含量试剂盒说明书

                                                  分光光度法50/48

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定                                             

测定意义:

氧自由基作用于脂质的不饱和脂肪酸,生成过氧化脂质;后者逐渐分解为一系列复杂的化合物,其中包括MDA。通过检测MDA的水平即可检测脂质氧化的水平。

测定原理:

MDA与硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid,TBA)缩合,生成红色产物,在532nm有大吸收峰,进行比色后可估测样品中过氧化脂质的含量;同时测定600nm下的吸光度,利用532nm与600nm下的吸光度的差值计算MDA的含量。

试剂的组成和配置:

产品名称

LM-OX8006-50T/48S

Storage

提取液:液体

60ml

4℃

试剂一:液体

40ml

4℃

说明书

一份

注意事项:

临用前注意试剂一是否完全溶解,如未溶解,可以70℃-90℃加热,并振荡以促进溶解。

需自备仪器和用品:

可见分光光度、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

MDA提取:

1、细菌、细胞或组织样品的制备:

细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

2、血清(浆)样品:直接检测。

测定步骤:

1、吸取0.6ml 试剂一于1.5ml离心管中,再加入0.2ml样本, 混匀。

2、95℃水浴中保温30min(盖紧,防止水分散失),置于冰浴中冷却,10000g,25℃,离心10min。

3、吸取上清液于1ml玻璃比色皿中,测定532nm和600nm处的吸光度,记为A532和A600,ΔA= A532-A600。

注意事项:

临用前注意试剂一是否完全溶解,如未溶解,可以70℃-90℃加热,并振荡以促进溶解。

MDA含量计算:

1、血清(浆)中MDA含量的计算:

MDA含量(nmol/ ml)=[ ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷V样=25.8×ΔA

2、细菌、细胞或动物组织中MDA含量计算

(1)按照蛋白浓度计算

MDA含量(nmol/ mg prot)=[ ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(Cpr×V样)=25.8× ΔA ÷Cpr

需要另外测定,建议使用本公司BCA蛋白质含量测定试剂盒。

(2)按照样品质量计算

MDA含量(nmol/g 鲜重)=[ ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W ×V样÷V样总)=25.8×ΔA ÷W

 (3 ) 按照细菌或细胞密度计算:

MDA含量(nmol/104)=[ ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总)=0.0516×ΔA

V反总:反应体系总体积, 8×10-4 L;ε:丙二醛摩尔消光系数,155×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.2 ml;V样总:加入提取液体积,1 ml;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/ml;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。



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