小鼠胚胎成纤维细胞介绍

胚胎干细胞（Embryonic Stem Cell，ESC）是由囊胚的内细胞团（InnerCellMass，ICM）分离培养的具有全能分化特性的细胞，具有长期自我增殖、自我更新和多向分化的潜能，能够再生出各种功能细胞和组织器官。体外培养ESC的基本原则是在促进ESC增殖的同时，维持其未分化的二倍体状态，保持其向三个胚层细胞分化的潜能。ESC体外培养主要采用饲养层培养法，目前使用最普遍的饲养层细胞有小鼠胚胎成纤维细胞（Mouse Embryonic Fibroblast，MEF）及小鼠成纤维细胞无限系（STO）细胞。MEF作为饲养层培养ESC是一种最常用的方法，它能有效地促进ESC的增殖并维持其未分化性和多潜能性，可用于大多数动物ESC的分离，大多数实验室均采用该细胞。

小鼠胚胎成纤维细胞特性

1)来源：取妊娠13.5d、14.5d的孕鼠昆明小鼠或者C57BL/6小鼠

2)含量：>5x105个/mL

3)鉴定：Vimentin与Keratin蛋白免疫荧光染色法

4)纯度：>85%

5)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

6)规格：1mL冻存管包装

小鼠胚胎成纤维细胞产品的运输和保存
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
产品使用
1)本产品仅能用于科研
2)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
3)本产品未通过用于活体诊断的审核

小鼠胚胎成纤维细胞收货处理：

T25：收货→观察细胞状态→酒精消毒→37度平衡2h→取培养基备用→传代或者继续培养。

血清：收货→酒精消毒→37度平衡2h→接种到完全培养基→ 观察细胞状态→继续培养。

离心管：收货→酒精消毒→37度平衡2h →离心收集细胞→新培养基重悬→接种观察细胞状态→继续培养。

干冰：收货→放液氮或-80冰箱→复苏→观察细胞状态→继续培养。

温馨提醒：

1、可将培养瓶内多余的培养基转移至50ml无菌离心管中，备用；细胞*传代时，可以将该培养基按照一定比例和客户自备的培养基混合使用，让细胞逐渐适应培养条件。

2、确认细胞状态良好后，应及时将部分细胞冻存，再进行后续的实验，避免后期实验失误可能发生细胞污染或死亡而导致的细胞丢失，影响后续实验。

3、建议客户收到细胞后前3天，100X、200X、400X各拍3张细胞照片，记录细胞状态，便于后续和技术支持沟通交流。