P19小鼠畸胎瘤细胞介绍

加拿大渥太华大学的Mc Burney 等在1982 年从雄性小鼠畸胎瘤中分离得到的 , 是一种能够在体外培养的多能干细胞, P19 细胞团经RA 诱导可分化成神经元、胶质细胞和纤维母细胞; 而经二甲基亚砜(DM SO ) 诱导则分化成心肌、骨骼肌和平滑肌细胞;在P19细胞向神经元分化的过程中，神经发育相关基因的表达模式基本模拟了正常小鼠神经发育过程, 因此, P19 目前被用作一个研究神经发育的体外模型。P19 细胞作为研究神经分化机制的模型, 显著区别于其他细胞系的四大特点是: ①它具有正常小鼠的二倍体核型, 细胞分裂快, 可在体外迅速大量扩增, 多次传代也不丧失其分化能力。②P19 细胞具有多种分化潜力, 不同诱导条件下可定向分化成不同类型的细胞, 种植到孕鼠囊胚中能分化成多种类型细胞。③根据P19 细胞诱导分化分阶段进行的特点, 能将神经分化的早期机制与参与突起延伸的机制分开研究。④该细胞易于转染, 且转染后仍能正常分化, 适于进行细胞基因研究。通过转染正常或突变的目的基因, 增强或抑制它们的表达水平可用于研究这些基因在神经分化中的作用。另外, 利用反义RNA 阻断内源蛋白的表达, 可用来观察这些蛋白在神经分化中的作用。

(references:

1.张金平等. 全反式维甲酸体外诱导P19细胞向心肌方向分化.[J]中国组织化学与细胞化学杂志.2012.1

2.梅宇钦等. 建立经优化的促P19鼠胚胎癌细胞神经分化模型.浙江大学学报（医学版）2012.04)

细胞特性

1） 来源：胚胎；畸胎癌

2） 形态：上皮细胞样

3） 含量：>1x106 个/mL

4） 污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

P19小鼠畸胎瘤细胞培养常见问题及其解决

1.如何选用特殊细胞系培养基？

培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞，很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之，*MEM做粘附细胞培养、RPMI-1640做悬浮细胞培养是一个好的开始。

2.P19小鼠畸胎瘤细胞何时须更换培养基？

视细胞生长密度而定， 或遵照细胞株基本数据上之更换时间，按时更换培养基即可。

3.可否使用与原先培养条件不同之培养基？

不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基， 若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基， 细胞大都无法立即适应， 造成细胞无法存活。

4.可否使用与原先培养条件不同之血清种类？

不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清， 在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。

5.何谓FBS, FCS, CS, HS ?

FBS (fetal bovine serum) 和FCS (fetal calf serum) 是相同的意思， 两者都是指胎牛血清， FCS 乃错误的使用字眼， 请不要再使用。CS (calf serum) 则是指小牛血清。HS (horseserum) 则是指马血清。

6.培养P19小鼠畸胎瘤细胞时应使用5% 或10% CO2？或根本没有影响？

一般培养基中大都使用HCO3-/CO3 2-/H+ 作为pH 的缓冲系统， 而培养基中NaHCO3 的含量将决定细胞培养时应使用的CO2 浓度。当培养基中NaHCO3 含量为每公升3.7 g 时，细胞培养时应使用10% CO2；当培养基中NaHCO3 为每公升1.5 g 时， 则应使用5% CO2 培养细胞。

7.Hank's 平衡盐溶液(HBS)要在空气中使用，不需要CO2培养箱。原因是什么？Hank's 平衡盐溶液(HBS)和Earle's平衡盐溶液(EBS)有什么本质的功能差别？

HBS和 EBS 的主要差别在于碳酸氢钠的水平,在Eagles (2.2 g/L)中比在Hanks (0.35 g/L) 中高。碳酸氢钠需用高水平的CO2平衡，以维持溶液的PH值。Eagles液在空气水平的CO2 中，溶液会变碱，Hanks液在CO2培养箱中会变酸。如果希望在CO2培养箱中保存组织，需要用Eagles液，。如果仅仅是清洗将要在细胞培养基中储存的组织，用Hanks液就可以了。