DB3.1 热敏感受态细胞

DB3.1 Chemically Competent Cell

保存条件： -80℃

产品规格:10×100μl

基因型：F- gyrA462 endA1 glnV44 (sr1-recA)mcrBmrrhsdS20(rB-,mB-)ara14galK2lacY1proA2rpsL20(Smr)xyl5 Δleu mtl1

简要说明:DB3.1 大肠杆菌菌株基因组中含有 gyrA462 基因，赋予其对 ccdB 毒性基因的抗性，特别适用于构建或扩繁含有 ccdB 基因的质粒载体（例 GATEWAY System vector)，此菌株具有链霉素抗性。High5TM系列 DB3.1 感受态细胞经特殊工艺制作，经 pUC19 检测转化效率>108 cfu/μg DNA。

操作说明：

1. DB3.1 感受态细胞放置冰中融化（或放手心或室温片刻，待菌体处于冰水混合状态时迅速

插入冰中），加入目的 DNA 并用指尖轻轻拨打管底混匀(避免用枪吸打)，冰上静置 25 分钟。

2. 42℃水浴热激 45 秒，迅速放回冰上并静置 2 分钟，晃动会降低转化效率。

3. 向离心管中加入 700μl 不含抗生素的无菌培养基（2YT 或 LB），混匀后 37℃，200 rpm 复苏 60 分钟。

4. 5000rpm 离心一分钟收菌，留取 100μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的 2YT 或LB 培养基上。

5. 将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养。

注意事项:

1. 感受态细胞*在冰上融化。

2. 混入目的 DNA 时应轻柔操作。