上海联迈生物工程有限公司
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SDS-PAGE浓缩胶缓冲液(4×)
  • 品牌:上海联迈生物工程有限公司
  • 产地:中国/上海
  • 货号:LM-0286
  • 发布日期: 2019-02-21
  • 更新日期: 2025-09-17
产品详请
产地 中国/上海
品牌 上海联迈生物工程有限公司
货号 LM-0286
保存条件 4℃保存
英文名称 SDS-PAGE Stacking Gel Buffer(4×)
CAS编号
保质期 一年

SDS-PAGE浓缩胶缓冲液(4×)

中文名称:

SDS-PAGE浓缩胶缓冲液(4×)

英文名称:

SDS-PAGE Stacking Gel Buffer(4×)

SDS-PAGE浓缩胶缓冲液(4×)产品规格:

200ml

发货周期:

1~3天

SDS-PAGE浓缩胶缓冲液(4×)

??本产品为配制SDS-PAGE浓缩胶缓冲液,可用于配制各种浓度的变性及非变性PAGE凝胶,方便、快捷。产品中已加入10%SDS,使用时不用另外加入。
操作步骤
根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE分离胶配制浓度,*胶浓度请参考附表1。

I 灌制分离胶(各试剂使用量请参考附表2)
1、参照凝胶模具说明书,装配好凝胶模具。
注:加入上层筛板有助于加样时保持填料与样品均匀接触,是否加入上层筛板可根据实际情况选择。
2、将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、分离胶缓冲液和纯水在小烧杯或试管中混合。
3、加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
4、在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液(对于mini-gel,凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5 cm或距梳齿约0.5 cm即可), 然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1 cm的水层,使凝胶表面保持平整。
5、静置30-60分钟,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后,表面凝胶已聚合。

II 灌制浓缩胶(各试剂使用量请参考附表3)
1、去除覆盖在分离胶上的水层。
2、将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、SDS-PAGE Stacking Gel Buffer(4×)浓缩胶缓冲液和纯水在一个小烧杯或试管中混合。
3、加入10%过硫酸铵和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
4、将浓缩胶溶液加至分离胶的上面,直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
5、将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。
6、静置10~20分钟,等待浓缩胶聚合。
7、待凝胶聚合后,小心地拔出梳子,以免破坏加样孔。
8、进行常规电泳操作。

附表1. SDS-PAGE分离胶的浓度与*分离范围

SDS-PAGE 分离胶浓度*分离范围
6%胶50-150 kD
8%胶30-90 kD
10%胶20-80 kD
12%胶12-60 kD
15%胶10-40 kD



附表2. 配制SDS-PAGE分离胶

分离胶浓度凝胶体积所需各组分体积(单位:ml)
纯水30%Acr-Bis(29:1)分离胶缓冲液(4×)10%APSTEMED
6%5ml2.751.01.250.050.004
10ml5.52.02.50.10.008
15ml8.253.03.750.150.012
20ml114.050.20.016
8%5ml2.421.331.250.050.003
10ml4.82.72.50.10.006
15ml7.254.03.750.150.009
20ml9.75.350.20.012
10%5ml2.081.671.250.050.002
10ml4.173.332.50.10.004
15ml6.255.03.750.150.006
20ml8.36.750.20.008
12%5ml1.752.01.250.050.002
10ml3.54.02.50.10.004
15ml5.256.03.750.150.006
20ml7.08.050.20.008
15%5ml1.252.51.250.050.002
10ml2.55.02.50.10.004
15ml3.757.53.750.150.006
20ml510.050.20.008



附表3. 配制5%SDS-PAGE浓缩胶

凝胶体积所需各组分体积(单位:ml)
纯水30%Acr-Bis(29:1)浓缩胶缓冲液(4×)10%APSTEMED
2ml1.140.340.50.020.002
4ml2.280.6810.040.004
6ml3.421.021.50.060.006
8ml4.561.3620.080.008



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