上海联迈生物工程有限公司
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Bradford蛋白定量试剂盒
  • 品牌:上海联迈生物工程有限公司
  • 产地:中国/上海
  • 货号:LM-0275
  • 发布日期: 2019-02-21
  • 更新日期: 2025-09-17
产品详请
产地 中国/上海
品牌 上海联迈生物工程有限公司
货号 LM-0275
保存条件 4℃保存
英文名称 Ultra Bradford Protein Assay Kit
CAS编号
保质期 一年

Bradford蛋白定量试剂盒

中文名称:

Bradford蛋白定量试剂盒

英文名称:

Ultra Bradford Protein Assay Kit

Bradford蛋白定量试剂盒产品规格:

800次微孔板(100管次)

发货周期:

1~3天

Bradford蛋白定量试剂盒

??Bradford 法是最简单和快速的比色蛋白定量方法。 这一方法基于考马斯亮蓝G-250与蛋白质结合后, 产生蓝色化合物,反应迅速而稳定。反应化合物在465-595 nm处有*的光吸收值,化合物颜色的深浅与蛋白浓度的高低成正比关系,因此可通过检测595 nm的光吸收值的大小来计算蛋白的含量。本产品将传统的Bradford方法进行了改良,*限度的加大蛋白定量的线性范围,变异性小于普通考马斯亮蓝染色法,灵敏度范围为100-1,500μg/ml。使用本产品反应迅速,颜色产物1小时内保持稳定。本试剂盒适用于多种缓冲液系统,不受金属离子、还原剂和螯合剂的干扰。
试剂盒组成

组成规格
Bradford Protein Assay Reagent2×100ml
BSA Standard Solution(2mg/ml)2ml



注意事项
1、BSA标准品的稀释液需与待测样品的稀释液一致(可用1×PBS或0.9%生理盐水进行稀释)。
2、本试剂盒不适合含有去污剂的蛋白定量,具体干扰物质(具体见附表1),可采用BCA蛋白定量试剂盒(WE0276)或其他蛋白定量产品。
3、所测蛋白分子量必须大于3 kD。

使用方法
1、稀释BSA标准品:用与待测蛋白样品相一致的稀释液按下表稀释BSA标准品。

管号稀释液用量(μl)BSA标准品用量(μl)BSA标准品最终浓度(μg/ml)
A01002000
B501501500
C2002001000
D200200(从C管中取)500
E200200(从D管中取)250
F200200(从E管中取)125
G20000(空白)



2、试管检测(检测范围:100-1500μg/ml)
1)按上表稀释标准品,将30μl稀释好的BSA标准品分别加到作好标记的试管中。
2)取干净的试管,分别加入30μl待测蛋白样品(原液或稀释液),并作好标记,推荐每个测定做2-3个平行反应。
3)向步骤1)和步骤2)的试管中各加入1.5ml Bradford Protein Assay Reagent,充分混匀,室温放置10分钟。
4)用分光光度计测定595 nm处的吸光值。
5)绘制标准曲线,计算样品中的蛋白浓度。
注意:数据处理时需要去除明显错误的值。未知样品浓度可以从标准曲线中查得, 实际浓度需要乘以样品的稀释倍数。如果是计算机绘制的曲线,可以从计算机给出的线性方程式计算出未知样品的浓度。
6)如果所得到的蛋白浓度不在检测范围内,请重新稀释样品后再次测定。

3、微孔检测(检测范围:100-1500μg/ml)
1)将按表1稀释好的A-G BSA标准品和待测蛋白样品(原液或稀释液)各5μl分别加到作好标记的96孔板微孔中。
2)每孔加入250μl Bradford Protein Assay Reagent,充分混匀,盖上96孔板盖,室温放置10分钟。
3)用酶标仪测定595 nm处的吸光值。
4)绘制标准曲线,计算样品中的蛋白浓度。
注意:数据处理时需要去除明显错误的值。未知样品浓度可以从标准曲线中查得, 实际浓度需要乘以样品的稀释倍数。如果是计算机绘制的曲线,可以从计算机给出的线性方程式计算出未知样品的浓度。
5)如果所得到的蛋白浓度不在检测范围内,请重新稀释样品后再次测定。

附表1. 干扰物质表

化合物耐受浓度
缓冲液
乙酸盐0.6M
甘氨酸0.1M
HEPES0.1M
MES0.7M
MOPS0.2M
Na+-柠檬酸50mM
PIPES500mM
磷酸钠/磷酸钠1M
乙酸钠0.6M
Tris2M
盐类
硫酸铵1M
NaCl1M
尿素6M
极性化合物
甘油99%
还原剂
β-巯基乙醇1M
DTT1M
去垢剂和变性剂
Brij35干扰
脱氧胆酸纳0.25%
CHAPS1%
NP-40干扰
辛葡糖2%
SDS0.1%
Tween-20干扰
Triton X-1000.1%
糖类
蔗糖1mM
螯合剂
EDTA100mM
EGTA50mM
其他
HCl0.1M
NaOH0.1M
NAD1mM
5%



储存条件:2~8℃


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