真菌总蛋白质微量提取试剂盒

中文名称：

真菌总蛋白质微量提取试剂盒

英文名称：

Fungal Total Protein Miniprep Kit

真菌总蛋白质微量提取试剂盒产品规格：

50次

发货周期：

1～3天

真菌总蛋白质微量提取试剂盒

本产品专门用于快速提取微量酵母蛋白用于SDS-PAGE凝胶电泳和Western印迹分析。本产品结合玻璃珠破壁和化学法破壁两种方法，适合于各种形态的各种酵母材料。
产品特点：
1．破壁效率高，能达到80-90%。
2．可以处理各种酵母样品。
3．操作简单，得到的裂解液可以直接用于SDS-PAGE和Western印迹分析。

试剂盒组成：

储存条件：常温运输、4℃保存(溶液B成分二需-20℃保存)，有效期一年。

使用方法：
准备工作：将溶液B成分二(干粉)全部加到50mL溶液B成分一中，充分摇晃使之全部溶解，成为溶液B，然后分装成小分(体积根据每次实验的样品数决定)并放-20℃长期保存。

1．将酵母细胞接种到5mL YPD培养基中，30℃摇晃(250rpm/分钟)过夜培养使其OD600达到0.5～2.0。
2．把酵母细胞培养物转到装有2mL预冷溶液A的10-15mL离心管中，混匀。
3．4℃，5000g离心5分钟沉淀酵母细胞，吸出上清液。
4．用30μL溶液B悬浮酵母细胞，并快速转移到1.5mL塑料离心管中。
5．100℃下保温3分钟，使蛋白酶失活，样品存放于-20℃。
6．加入0.1g的玻璃珠。
7．在旋涡振荡器上剧烈振荡混合2-10分钟。
8．加入70μl溶液B，稍加振荡，置100℃保温1分钟。
9．取5-20μl抽提液上样直接进行SDS-PAGE凝胶电泳