常温稳定BL21(DE3)感受态细胞

中文名称：

常温稳定BL21(DE3)感受态细胞

英文名称：

Extremely Stable BL21(DE3) Competent Cells

常温稳定BL21(DE3)感受态细胞产品规格：

100μl×10支

发货周期：

1～3天

常温稳定BL21(DE3)感受态细胞

本制品室温可保存1个月、-20℃可保存2年（推荐保存温度）、-80℃可长期保存性能无下降。运输过程中无需干冰，可室温运输、可常规冰袋运输（推荐运输温度）。本BL21(DE3)感受态细胞为热激感受态细胞，专门用于蛋白表达（不可用于克隆和载体构建），经42℃热激1分钟可获得10⁵～10⁶cfu/μg效价，可满足质粒转化要求。该制品使用简单、运输、储存方便。
产品组成：

保存条件：-20℃可保存半年，-70度可保存2年；可室温运输。

使用方法：
1．从-20℃冰箱中取出Nano E.coli Transfection Reagent彻底融化，放置于冰上。
? 注意：该试剂含长链带电化合物，允许反复冻融20次，使用完毕后继续-20℃保存。 
2．取50μl Nano E.coli Transfection Reagent置于0.2ml EP管中，加入1～20ng质粒DNA（不可使用连接产物），枪头吹打混合均匀，冰上放置2～5分钟。
? 注意：放置时间不要超过30分钟，过长时间会导致核酸聚合，从而影响转化效价。 
3．将上述混合物（50μl Nano E.coli Transfection Reagent和质粒DNA）加入到一支RTS BL21(DE3)感受态细胞干粉中，枪头轻轻吹打，彻底溶解细胞干粉，置于冰上15分钟。
? 注意：使用RTS BL21(DE3)感受态细胞干粉前，轻甩干粉至管底部，如果发现干粉已经溶解则不可使用。 
4．置于42℃热激1分钟后，迅速置于冰上急冷2分钟。 
5．向热激完毕的感受态细胞中，加入450μl不含抗生素的SOC培养基(或LB培养基)，37℃振荡（225 rpm）培养60分钟。使质粒上抗性标记基因表达，菌体复苏。 
6．取200μl复苏菌液涂布到含相应抗生素的LB琼脂平板表面。 
7．将平板置于37℃培养，12～18小时后可出现菌落。 
8．获得的表达菌，可使用IPTG进行诱导表达，从而获得重组蛋白