ER2566化学感受态细胞

中文名称：

ER2566化学感受态细胞

英文名称：

ER2566 Chemically Competent Cell

ER2566化学感受态细胞产品规格：

10×100μl/50×100μl

发货周期：

1～3天

ER2566化学感受态细胞

ER2566感受态细胞为lon和ompT蛋白酶缺陷菌株。
膜外蛋白酶OMPT的缺失能够有效防止表达的异源目的蛋白在细菌体内的降解。
ER2566感受态细胞采用特殊化学试剂制作，可用于DNA的化学转化，经pUC19质粒检测转化效率达108cfu/μg。
保存条件：-80℃

基因型：
F-λ-fhuA2[lon] ompT lacZ::T7gene1 gal sμlA11Δ(mcrC-mrr)114::IS10R(mcr-73::miniTn10-TetS)2 R(zgb-210::Tn10)(TetS)endA1 [dcm]
操作说明：
1.取100μl冰上融化的ER2566感受态细胞，加入目的质粒并轻轻混匀，冰上静置25分钟。
2.42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB)，混匀后37℃，200rpm复苏60分钟。
4.5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
注意事项：
1.感受态细胞*在冰上融化。
2.混入质粒时应轻柔操作。
3.转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
4.诱导时，IPTG浓度可选(0.1-2mM均可)。
5.为获得需要量的蛋白，*诱导时间，温度，IPTG浓度需实验者优化