Rosetta(DE3)化学感受态细胞

中文名称：

Rosetta(DE3)化学感受态细胞

英文名称：

Rosetta(DE3)Chemically Competent Cell

Rosetta(DE3)化学感受态细胞产品规格：

10×100μl/50×100μl

发货周期：

1～3天

Rosetta(DE3)化学感受态细胞

Rosetta(DE3)感受态细胞具有氯霉素抗性，补充大肠杆菌缺乏的6种稀有密码子(AUA，AGG，AGA，CUA，CCC，GGA)对应的tRNA，提高外源基因，尤其是真核基因在原核系统中的表达水平，该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3区(DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶)，同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶，可用于pET系列，pGEX，pMAL等质粒的蛋白表达。
Rosetta(DE3)感受态细胞由特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率高达108cfu/μg。
保存条件：-80℃

基因型：
F-ompT hsdSB(rB-mB-)gal dcm(DE3)pRARE(argU，argW，ileX，glyT，leuW，proL)(CamR)
操作说明：
1.取100μl冰上融化的Rosetta(DE3)感受态细胞，加入目的质粒并轻轻混匀，冰上静置25分钟。
2.42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB)，混匀后37℃，200rpm复苏60分钟。
4.5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养