BL21化学感受态细胞

中文名称：

BL21化学感受态细胞

英文名称：

BL21 Chemically Competent Cell

BL21化学感受态细胞产品规格：

10×100μl/50×100μl

发货周期：

1～3天

BL21化学感受态细胞

BL21是最早开发的用于原核表达的菌株，BL21(DE3)、Rosetta、OrigamiB(DE3)等一系列原核表达菌株均来源于BL21菌株。
该菌株主要用于非毒性蛋白的表达，不含T7 RNA聚合酶，所以不能用于由T7启动子驱动的蛋白表达(如：pET系列)；但含有大肠杆菌RNA聚合酶，可以用于tac或trc等使用大肠杆菌RNA聚合酶的原核系统的表达(如：pGEX，pMAL质粒)。
BL21感受态细胞由特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率达107cfu/μg。
保存条件：-80℃

基因型：
E.coli B F-dcm ompT hsdS(rB-mB-)gal [malB+]K-12(λS)
操作说明：
1.取100μl冰上融化的BL21感受态细胞，加入目的质粒并轻轻混匀，冰上静置25分钟。
2.42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB)，混匀后37℃，200rpm复苏60分钟。
4.5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
注意事项：
1.感受态细胞*在冰上融化。
2.混入质粒时应轻柔操作。
3.转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
4.诱导时，IPTG浓度可选(0.1-2mM均可)。
5.为获得需要量的蛋白，*诱导时间，温度，IPTG浓度需实验者优化