一步法快速克隆试剂盒

中文名称：

一步法快速克隆试剂盒

英文名称：

Plus One Step Cloning Kit

一步法快速克隆试剂盒产品规格：

25T

发货周期：

1～3天

一步法快速克隆试剂盒

本试剂盒是一款简单、快速、高效的DNA定向克隆产品，该试剂盒可以将PCR产物定向克隆至任意载体的任意位点，可高效克隆50 bp～10 kb片段。将载体在克隆位点进行线性化，并在插入片段PCR引物5’端引入线性化克隆载体末端序列，使得插入片段PCR产物5’和3’最末端分别带有和线性化克隆载体两末端对应的完全一致的序列 (15bp～25bp)。将这种两端带有载体末端序列的PCR产物和线性化克隆载体按一定比例混合，在重组酶的催化下，仅需反应15 min即可进行转化，完成定向克隆。克隆阳性率可达95%以上。克隆载体酶切产物或PCR产物和插入片段PCR产物可以不进行DNA纯化直接用于重组克隆，极大的简化了实验步骤。
试剂盒中2×Enzyme Premix预混了重组酶和重组反应所需缓冲液，并添加了独特的重组增强因子，可显著提高重组克隆效率，即便使用低效率感受态细胞 (107cfu/μg)也可实现高效克隆 (100cfu/ng Vector)，重组体系还兼容常规酶切、PCR反应体系。

产品用途：该试剂盒可用于快速克隆、高通量克隆、无缝克隆和DNA定点突变。

产品组份：
2×Enzyme Premix————250μl
500 bp control insert(30ng/μl)————5μl
pUC 19 control vector, linearized (50ng/μl)————5μl

储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期一年。

实验流程概览:

1）线性化克隆载体制备；
2）插入片段扩增引物设计；
3）插入片段PCR扩增；
4）进行重组反应；
5）反应产物转化、涂板；
6）克隆鉴定。