多片段一步法(快速/无缝)克隆试剂盒

中文名称：

多片段一步法(快速/无缝)克隆试剂盒

英文名称：

Multi One Step Cloning Kit

多片段一步法(快速/无缝)克隆试剂盒产品规格：

10T

发货周期：

1～3天

多片段一步法(快速/无缝)克隆试剂盒

本产品是一款简单、快速、高效的多片段DNA定向克隆产品，该试剂盒可以将PCR产物定向克隆至任意载体的任意位点。将载体在克隆位点进行线性化，并在插入片段PCR引物5’端引入线性化克隆载体末端序列，使得插入片段PCR产物5’和3’最末端分别带有和线性化克隆载体两末端对应的完全一致的序列 (15 bp～20 bp)。将这种两端带有载体末端序列的PCR产物和线性化克隆载体按一定比例混合，在重组酶Exnase的催化下，仅需反应30 min即可进行转化，完成定向克隆。克隆阳性率可达95%以上。克隆载体酶切产物或PCR产物和插入片段PCR产物可以不进行DNA纯化直接用于重组克隆，极大的简化了实验步骤。
试剂盒中包含有针对多片段重组反应而优化的反应缓冲液和重组酶Exnase。使用该试剂盒，可以一次实现多至5个片段的顺序拼接克隆。Exnase还兼容常规酶切、PCR反应体系。

该试剂盒可用于多片段拼接克隆、全基因合成和DNA定点突变。

产品组份：

5×CE Buffer——————40 μl
Exnase——————20μl
pUC 19 control vector, linearized (50 ng/μl)————5μl
Control insert Mix(0.5 kb, 10 ng/μl; 1 kb, 20 ng/μl; 2 kb, 40 ng/μl)————5μl

实验流程概览

1) 线性化克隆载体制备；
2) 插入片段扩增引物设计；
3) 插入片段PCR扩增；
4) 进行重组反应；
5) 反应产物转化、涂板；
6) 克隆鉴定.