XL10-Gold化学感受态细胞

中文名称：

XL10-Gold化学感受态细胞

英文名称：

XL10-Gold Chemically Competent Cell

XL10-Gold化学感受态细胞产品规格：

100μl×10管

发货周期：

1～3天

XL10-Gold化学感受态细胞

XL10-Gold化学感受态细胞是经特殊工艺处理得到的感受态细胞，特别适合于大分子量DNA的高效转化。具有四环素和氯霉素抗性，使用Puc19质粒测得其转化效率达108cfu/μg，
本品基因型：TetrΔ(mcrA)183Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lac Hte [F′proAB lacIqZΔM15 Tn10 (Tetr) Amy Camr]。

主要具有如下特点：
① Hte表型可增强较大分子量质粒和连接产物的高效转化；
② 具有限制性内切酶缺陷性，更利于克隆 DNA 的稳定和高纯度质粒 DNA 的提取；
③ 更适于质粒文库的构建；
④ 具有lacIqZΔM15，可用于蓝、白斑筛选。

注意事项

1）感受态细胞应保存在-80℃，不可反复冻融和放置时间过长，以免降低感受态细胞的转化效率。
2）整个转化操作，严格根据相应温度及无菌条件要求进行。
3）为确保*转化效率，整个操作过程应尽量轻柔，并保持低温，且每次转化感受态使用量，不低于100μl。
4）为防止转化不成功，可以保留部分连接反应液，以重新转化，*化实验可能遇到的风险。

使用方法

1）取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。
2）向100μl感受态细胞悬液中加入0.1-50ng（＜10μl /100μl感受态）目的DNA或2μl连接产物，轻轻旋转离心管以混匀内容物，在冰浴中静置30min。
3）置于42℃水浴中热激30s，然后快速将管转移到冰浴中，冷却2-3min，该过程不要摇动离心管，否则会降低转化效率。
4）向离心管中加入900μl 42℃预热的无菌NZY+培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃摇床振荡培养1h（225-250rpm），目的是促使菌体复苏。
【注】：此步也可用LB培养基（不含抗生素）进行菌体复苏。
5）取上述≤200μl转化产物涂至含有相应抗生素的LB固体平板上，将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
【注】：如需做蓝白斑筛选，需至少孵育17h，以充分显色。

储存条件：-80℃