BL21 (DE3)化学感受态细胞

中文名称：

BL21 (DE3)化学感受态细胞

英文名称：

BL21 (DE3) Chemically Competent Cell

BL21 (DE3)化学感受态细胞产品规格：

100μl×10管

发货周期：

1～3天

BL21 (DE3)化学感受态细胞

本品是在大肠杆菌BL21（DE3）菌株基础上制备的化学转化感受态细胞，是以T7 RNA聚合酶为表达系统的基因的高效表达宿主，其基因型为F-ompT hsdS (rB- mB-) gal dcm (DE3)。经检测，本品无外源质粒DNA残留，转化效率≥107 cfu/μg pUC19 DNA。适合非毒性蛋白重组表达。
组份：
BL21 (DE3)化学感受态细胞 100μl×10
pUC19（0.1 ng/μl） 5μl

注意事项

1）感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用。
2）待转化DNA加入体积不要超过感受态细胞体积的1/10。
3）待转化DNA加入感受态细胞后，请勿用移液枪吹打，轻轻弹匀即可。
4）为确保*效率转化，整个操作过程应尽量轻柔，并保持低温。
5）本品应于-80℃保存，请勿将感受态细胞储存于-20℃或液氮中保存。
6）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1）将感受态细胞从-80℃中取出，置于冰水浴中融化。
2）将待转化DNA加入到100 μl感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育30分钟。
3）42℃水浴，不要晃动，准确热激90s后，立刻置于冰水浴中，静置2-3分钟。
4）向离心管中加入900 μl LB或SOC培养基，37℃水浴锅中静置10分钟。
5）150 rpm, 37℃振荡培养45分钟，使菌体复苏，抗性基因表达。
6）2,500 g离心5分钟，去掉900 μl上清。用剩余培养基将菌体重悬，用无菌涂布棒在含有正确抗性的平板上轻轻涂匀。室温正置10分钟。待菌液被平板吸收后，37℃倒置培养过夜。
【注】：也可直接吸取100-200 μl孵育后的菌液涂板。剩余菌液可在4℃保存，一周之内都可重新涂板。

储存：-80℃