phi29 DNA 聚合酶

中文名称：

phi29 DNA 聚合酶

英文名称：

phi29 DNA Polymerase

phi29 DNA 聚合酶产品规格：

500U|10000U

发货周期：

1～3天

phi29 DNA 聚合酶

phi29 DNA 聚合酶是从嗜热脂肪芽孢杆菌Bacillus subtilis噬菌体phi29中克隆出的嗜温DNA聚合酶，在大肠杆菌中进行表达后经多次纯化分离而得。phi29 DNA聚合酶具有特殊的链置换和连续合成特性，可连续合成长达70kb的DNA片段。另外，phi29 DNA聚合酶具有3’→5’外切酶校读功能，合成的DNA片段保真性高。该酶的外切酶活性较强，因此合成过程中对引物3’端进行修饰，以降低外切活性对引物的切割效应尤为必要。
产品特点：
1．超强链置换能力；
2．连续合成能力；
3．扩增的高保真性。

产品应用：
1．DNA恒温扩增；
2．需强链置换和DNA连续合成的反应；
3．质粒快速复制；
4．高保真快速复制。

产品组成：

保存条件：-20℃保存，有效期3年。

单位定义：一个活力单位即在30℃条件下，10分钟内催化0.5pmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。

反应实例：

应用phi29 DNA聚合酶、硫代修饰引物扩增pEasy质粒，30℃孵育3h。B：用pstI酶切phi29扩增的PCR产物。

注意事项：
1．1×phi29 Buffer：50 mM Tris-HCl pH 7.5，10 mM MgCl2，10 mM（NH4)2S04，4 mM DTT。必要时可单独额外添加终浓度 1 mM DTT 和 0.2mg/ml BSA，可提高反应效率。
2．该酶的*反应温度为 30℃。
3．65℃ 10分钟即可使该酶失活。
4．根据实验类型需要，调整 dNTP的浓度 100~500μM。
5．添加 Yeast Pyrophosphatase 可提高 DNA 产量。
6．反应引物 3’端的硫代修饰可避免引物降解。

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