上海联迈生物工程有限公司
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一步法荧光定量RT-PCR MasterMix(TaqMan)
  • 品牌:上海联迈生物工程有限公司
  • 产地:中国/上海
  • 货号:LM-0021
  • 发布日期: 2019-01-21
  • 更新日期: 2025-09-18
产品详请
产地 中国/上海
品牌 上海联迈生物工程有限公司
货号 LM-0021
保存条件 4℃保存
英文名称 2×One-step TaqMan RT-PCR Mix
CAS编号
保质期 一年

一步法荧光定量RT-PCR MasterMix(TaqMan)

中文名称:

一步法荧光定量RT-PCR MasterMix(TaqMan)

英文名称:

2×One-step TaqMan RT-PCR Mix

一步法荧光定量RT-PCR MasterMix(TaqMan)产品规格:

200T|5000T

发货周期:

1~3天

一步法荧光定量RT-PCR MasterMix(TaqMan)

本产品常用于RNA的相对定量检测,采用TaqMan探针进行Real-Time PCR的专用试剂,可在单管中完成由RNA到定量PCR。试剂中包含热启动Taq DNA聚合酶、反应Buffer、dNTP、MLV、Rnase Inhibitor等试剂预混在一起,是一种2×浓度的单组分预混试剂,进行实验时,PCR反应液的配制十分方便简单,只需加入上下游引物、探针、RNA模板、水即可。制品中的反转录反应依赖于PCR扩增的反向引物,无需加入随机或Oligo dT引物。
本产品配有单独的ROX内参染料,使得该试剂可应用于所有RealTime PCR 机型,包括:ABI 7000/7700/7900HT, 7300/7500/7500 Fast Real-Time PCR(Applied Biosystems);Mx3000P(Stratagene);LightCycler(Roche Diagnostics) ;Opticon2、MyiQ 2、CFX96 Real-Time PCR(Bio-Rad&MJ);Line-Gene(Bioer,杭州博日)等。

产品特点:
1.反转录和PCR单管扩增,一步完成。
2.热启动酶采用化学修饰,100%热启动。
3.单组份预混液,使用方便快捷。
4.高特异性,有效抑制非特异性扩增。
5.适用于所有实时定量PCR仪器。

产品组成:

组分200T×20μl5000T×20μl
2×One-step TaqMan
RT-PCR Mix
1ml×250ml
50×ROX Reference Dye200μl2ml



保存条件:-20℃保存,有效期三年。(经常使用,融化后可置于4℃,可保存1年。长期-20℃保存可能会出现沉淀,室温融化后混合均匀,不影响试剂性能。)

操作方法:

1.根据机型选择步骤A或B
A:需要添加 ROX 染料进行反应孔间信号矫正的Real-Time PCR仪,包括:ABI PRISM7000/7700/7900HT,7300/7500/7500 Fast Real-Time PCR(Applied Biosystems);Mx3000P(Stratagene)等。按照如下组分配制 20μl PCR 反应体系:

加入物加入量终浓度
2×One-Step TaqMan
RT-PCR Mix
10μl
50×ROX Reference Dye0.4μl
PCR Forward Primer(10μM)0.8μl0.4μM
PCR Reverse Primer(10μM)0.8μl0.4μM
TaqMan探针(10μM)0.4μl0.2μM
RNA模板1~200 ng
ddH2OUp to 20μl


B:无需添加 ROX 染料进行反应孔间信号矫正的Real-Time PCR 仪,包括:LightCycler(Roche Diagnostics);MiniOpticon、Opticon2、MyiQ 2、CFX96 Real-TimePCR(Bio-Rad & MJ);Line-Gene(Bioer,杭州博日)等。按照如下组分配制 20μl PCR 反应体系:

加入物加入量终浓度
2×One-Step TaqMan
RT-PCR Mix
10μl
PCR Forward Primer(10μM)0.8μl0.4μM
PCR Reverse Primer(10μM)0.8μl0.4μM
TaqMan探针(10μM)0.4μl0.2μM
RNA模板1~200 ng
ddH2OUp to 20μl



2.进行 Real-Time PCR 反应,通常采用两步法,程序如下:

加入物加入量终浓度循环数
Stage 1:50℃5分钟
Stage 2:95℃30s
Stage 3:95℃10s35~40
60℃45s



3.反应结束后确认 Real-Time PCR的扩增曲线、融解曲线和标准曲线。

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