荧光定量PCR MasterMix(SYBR Green)

中文名称：

荧光定量PCR MasterMix(SYBR Green)

英文名称：

2×SYBR Green qPCR MasterMix

荧光定量PCR MasterMix(SYBR Green)产品规格：

1ml|1ml×5|100ml

发货周期：

1～3天

荧光定量PCR MasterMix(SYBR Green)

本品是采用SYBR Green 嵌合荧光法进行 Real-Time PCR的专用试剂, 将化学修饰的热启动Taq DNA 聚合酶、反应Buffer、dNTP、SYBR Green染料等试剂预混在一起，是一种2X浓度的单组分预混试剂，进行实验时，PCR反应液的配制十分方便简单，只需加入引物、模板、水即可。
2×SYBR Green qPCR Mix中的DNA聚合酶为化学法修饰的Hot Start Taq DNA 聚合酶，该酶在50℃以下100%无活性，只有95℃条件下加热15分钟后才能完全恢复酶的活力。因此该系统可以有效抑制非特异性PCR扩增，极大的提高了PCR扩增特异性。该试剂盒独特的反应缓冲液，可在宽范围中得到良好的扩增结果、检测灵敏度更高、信号更强。

本品配有单独的ROX内参染料，使得该试剂可应用于所有RealTime PCR 机型，包括：ABI 7000/7700/7900HT, 7300/7500/7500 Fast Real-Time PCR（Applied Biosystems)；Mx3000P（Stratagene)；LightCycler（Roche Diagnostics) ；Opticon2、MyiQ 2、CFX96 Real-Time PCR(Bio-Rad&MJ)；Line-Gene(Bioer，杭州博日)等。


图：A-C为使用SYBR Green法检测 10～107copy模板的扩增曲线、融解曲线和标准曲线。D.重复性高，误差<±0.5Ct。 

特点：
1．热启动酶采用化学修饰，100%热启动
2．单组份预混液，使用方便快捷
3．高特异性，有效抑制非特异性扩增
4．高灵敏度，可检测低丰度基因
5．适用于所有实时定量PCR仪器

产品组成：

储存：请避光置于-20℃或-70℃可保存3年。 注：长期-20℃保存可能会出现沉淀，室温融化后混合均匀，不影响试剂性能。

注意事项：
1．2×SYBR Green qPCR Mix于-20℃保存时容易形成沉淀，可用手轻握或室温放置一段时间后，颠倒混匀待其完全融解后使用。
2．本制品请避光保存(短期6个月内使用可置于4℃)，使用频率低时置于-20℃，反复冻融会使制品性能下降。
3．配制反应液时，注意避免强光照射，并于冰上操作。

使用方法：

1．根据PCR仪选择步骤A或B

A：需要添加 ROX 染料进行反应孔间信号矫正的Real-Time PCR 仪，包括：ABI PRISM7000/7700/7900HT,7300/7500/7500 Fast Real-Time PCR（Applied Biosystems)；Mx3000P（Stratagene)等。按照如下组分配制 20μl PCR 反应体系：

B:无需添加 ROX 染料进行反应孔间信号矫正的Real-Time PCR 仪，包括：LightCycler（Roche Diagnostics)；MiniOpticon、Opticon2、MyiQ 2、CFX96 Real-Time PCR(Bio-Rad & MJ)；Line-Gene(Bioer，杭州博日)等。按照如下组分配制 20μl PCR 反应体系：

2．进行 Real-Time PCR 反应,通常采用两步法，程序如下：

注意：由于该酶为化学修饰的热启动 Taq DNA 聚合酶，必须于 95℃加热15分钟 才能恢复酶的活性，该热启动步骤不能缩短时间。

3．反应结束后确认 Real-Time PCR的扩增曲线、融解曲线和标准曲线。