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UDG酶
  • 品牌:上海联迈生物工程有限公司
  • 产地:中国/上海
  • 货号:LM-0059
  • 发布日期: 2019-01-21
  • 更新日期: 2025-09-19
产品详请
产地 中国/上海
品牌 上海联迈生物工程有限公司
货号 LM-0059
保存条件 4℃保存
英文名称
CAS编号
保质期 一年

UDG酶

中文名称:

UDG酶

英文名称:

UDG酶产品规格:

200U

发货周期:

1~3天

UDG酶

??UDG酶分子量25KDa,能特异性识别DNA单链或双链中的尿嘧啶残基,并从DNA上水解去除尿嘧啶残基,防止DNA发生突变,是碱基切除 修复过程中的重要组分,对RNA无活性。
产品用途
UDG酶常被用于消除PCR扩增中的残余污染。在PCR反应液配制时,将dUTP和dTTP 按一定的比例混用,使得扩增产物都含有脱氧尿嘧啶。在进行PCR扩增前,在PCR混合液添加UDG酶,并增加2分钟37℃~50℃的保温步骤即可消除以往PCR产物的残留污染,由于UDG在PCR循环中的94℃dU的PCR产物。

使用建议
UDG酶在Taq酶反应缓冲液中同样具有活性。在PCR反应液中直接添加UDG酶即可,推荐用量为0.2U每50μl体系,在PCR循环程序前增加2分钟37℃ ~50℃保温及可完全消除多达1ng含UTP模板的污染。

应用示例
UDG酶特异性降解含UTP的DNA模板

反应体系:

加入物加入量
2×Taq MasterMix25μl
500bp模板(含UTP)1ng
500bp扩增引物对终浓度0.2μM
250bp模板(无UTP掺入)1ng
250bp扩增引物对2终浓度0.2μM
dH2O至50μl


对照组未添加UDG酶,实验组每50μl反应体系中添加0.2U UDG酶。

PCR循环程序

50℃2分钟(降解含UTP的 污染模板)
94℃4分钟(灭活UDG酶)
30次循环94℃,30秒
57℃,30秒
72℃,30秒
72℃5分钟
4℃保温



UDG酶
图例1) 结果显示:UDG酶能特异性降解含UTP的DNA模板并阻止其 PCR扩增,且不影响正常模板的PCR 扩增反应。
泳道M:DL2000 泳道1,2:对照组,未添加UDG酶 
泳道3,4:实验组,0.2U UDG酶处理

活性定义:60分钟内催化1nmol尿嘧啶从含尿嘧啶双链DNA上释放所需要的酶量定义为一个单位。

常用PCR残余污染消除体系:

加入物加入量
5×Taq Buffer with Mg2+10μl
上游引物0.2-1.0μM (终浓度)
下游引物0.2-1.0μM (终浓度)
dATP, dGTP, dCTP各0.2mM(终浓度)
dTTP0.1mM(终浓度)
dUTP0.2mM(终浓度)
如全部使用dUTP替代dTTP0.4mM(终浓度)
模板1-50ng(质粒)
10ng-1μg(基因组)
Taq0.25μl(1.25U )
ddH2O至50μl
UDG酶0.2U,如残余污染严重可适量增加酶用量


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