PCR优化试剂盒
- 发布日期： 2019-01-21
- 更新日期： 2026-01-16
产品详请
| 产地 |
中国/上海
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| 品牌 |
上海联迈生物工程有限公司
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| 货号 |
LM-0045
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| 保存条件 |
4℃保存
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| CAS编号 |
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| 保质期 |
一年
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PCR优化试剂盒
中文名称：
PCR优化试剂盒
英文名称：
PCR Optimization Kit
PCR优化试剂盒产品规格：
80次
发货周期：
1～3天
PCR优化试剂盒
??本试剂盒为您提供了8 种耐热聚合酶和相应的精心配制的缓冲液，其中缓冲液的pH值，盐离子浓度和助溶剂成分等各不相同，当扩增某些复杂的基因模板等出现问题时，应测试不同的聚合酶及反应缓冲体系。另外，本试剂盒还提供了PCR增强剂，能增加引物的特异性，提高DNA聚合酶的热稳定性，适应较宽范围的退火温度和Mg2+浓 度。可以在试剂盒提供的8种聚合酶及相应反应体系的基础上再添加PCR增强剂，以找到PCR最适反应体系从而达到*的PCR反应效果。
为什么选择本试剂盒？
影响PCR反应的因素很多，如聚合酶本身的性质，pH值，酶保护剂，助溶剂等，只有在这些因素都是最适的情况下才能获得较好的扩增产物。
试剂盒组成：
| 组份 | 规格 |
| Taq DNA 聚合酶(5U/μl) | 20μl |
| 5×Taq Buffer with Mg2+ | 1ml |
| UltraTaq DNA 聚合酶 (5U/μl) | 20μl |
| 5×UltraTaq Buffer with Mg2+ | 1ml |
| Taq Plus DNA 聚合酶 (5U/μl) | 20μl |
| 5×Taq Plus Buffer with Mg2+ | 1ml |
| UltraTaq Plus酶 (5U/μl) | 20μl |
| 5×UltraTaq Plus Buffer with Mg2+ | 1ml |
| Pfu DNA 聚合酶 (5U/μl) | 20μl |
| 10×Pfu Buffer with Mg2+ | 1ml |
| Fast Pfu DNA 聚合酶 (5U/μl) | 20μl |
| 5×Fast Pfu Buffer with Mg2+ | 1ml |
| 2×Hot Start Taq PCR MasterMix | 500μl |
| 2×Hot Start Taq Plus PCR MasterMix | 500μl |
| PCR 增强剂I | 200μl |
| PCR 增强剂II | 200μl |
各种PCR聚合酶的反应速度：
| PCR聚合酶 | 反应速度 |
| Taq DNA 聚合酶 | 1kb/60秒 |
| UltraTaq DNA 聚合酶 | 4kb/60秒 |
| Taq Plus DNA 聚合酶 | 1kb/60秒 |
| UltraTaq Plus酶 | 4kb/60秒 |
| Pfu DNA 聚合酶 | 0.5kb/60秒 |
| Fast Pfu DNA 聚合酶 | 2kb/60秒 |
| Hot Start Taq DNA 聚合酶 | 1kb/60秒 |
| Hot Start Taq Plus DNA 聚合酶 | 1kb/60秒 |
常用反应体系(50ul)：
| 组分 | 体积 |
| 5×Buffer | 10μl |
| 上游引物 | 0.05uM（终浓度） |
| 下游引物 | 0.05uM（终浓度） |
| dNTP(各10mM) | 1.0μl |
| 模板 | 1-50ng（质粒） |
| 10ng-1ug(基因组) |
| PCR聚合酶 | 0.25μl(1.25U) |
| ddH2O | 至50μl |
常用PCR循环：
| 当扩增片段＜3K： |
| 94℃ | 1分钟30秒 |
| 30次循环 | 94℃,20秒
57℃,20秒
72℃ 根据产物长度调整，各种聚合酶的扩增速度见上面表格 |
| 72℃ | 5分钟 |
| 4℃ | 保温 |
| 当扩增片段≥3K（推荐引物长度≥30bp）： |
| 94℃ | 1分钟30秒 |
| 30次循环 | 94℃,5秒
68℃根据产物长度调整，各种聚合酶的扩增速度见上面表格 |
| 72℃ | 5分钟 |
| 4℃ | 保温 |
| * Hot start Taq DNA聚合酶和Hot start Taq Plus DNA聚合酶预变性条件为94℃，10分钟 |
