上海联迈生物工程有限公司
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多重PCR扩增试剂盒
  • 品牌:上海联迈生物工程有限公司
  • 产地:中国/上海
  • 货号:LM-0037
  • 发布日期: 2019-01-21
  • 更新日期: 2025-09-19
产品详请
产地 中国/上海
品牌 上海联迈生物工程有限公司
货号 LM-0037
保存条件 4℃保存
英文名称 Multiplex PCR Kit
CAS编号
保质期 一年

多重PCR扩增试剂盒

中文名称:

多重PCR扩增试剂盒

英文名称:

Multiplex PCR Kit

多重PCR扩增试剂盒产品规格:

50μl(100次)

发货周期:

1~3天

多重PCR扩增试剂盒

??本试剂盒针对多重PCR的高产需求及DNA聚合酶的强聚合能力而优化,可在同一个PCR反应体系中,对多个基因使用多对引物同时进行特异性扩增(最多可加入10对引物)。当引物对较多时,可适当添加HotStart Taq DNA 聚合酶和dNTPs以达到良好的扩增效果。
产品用途:常规PCR鉴定、高产量PCR、高通量PCR、多重PCR。

试剂盒组成

组份体积
5×Multiplex PCR Buffer(5U/μl)1ml
HotStart Taq DNA聚合酶(5U/μl)100μl
dNTPs(10mM)250μl



使用建议
1、使用本制品时务必将Buffer反复混匀后再加,避免因组分不一导致结果差异;
2、配置和分装反应液时请一定使用新的(无污染的)枪头以避免污染;
3、如扩增条带多,可适当添加酶和dNTPs;
4、当多重 PCR扩增产物的长度均在1 kb以内时,使用 3%~4%浓度的 Agarose gel进行电泳分离效果*。

多重PCR引物设计注意事项
1、尽量减小各引物间的 Tm 值差;
2、目的片段长度尽量在 1kb以下;
3、引物的长度保持在 22~30bp,GC含量在50~60%为宜,并避免局部区域GC或AT的含量过高;
4、引物应用于多重PCR前要预先对各目的基因进行扩增,以确认引物的特异性及反应性能。

应用实例

图例一)50μl扩增体系中,以50ngλDNA为模板,对长度范围在100-800bp之间的片段的扩增结果。
泳道M:DL2000 DNA Marker;泳道1,泳道2:使用7对不同引物同时扩增的结果

常用反应体系(50μl):

成分体积
5×Multiplex PCR Buffer10μl
上游引物*n0.2-1.0μM(终浓度)
下游引物*n0.2-1.0μM(终浓度)
模板50ng
dNTPs1.5μl
HotStart Taq DNA聚合酶1μl
ddH2O至50μl



常用PCR循环

当扩增片段<3K:
94℃5min
30次循环94℃,20s
57℃,20秒
72℃,根据产物长度调整,1kb/min
72℃5min
4℃保温



常见问题及解答
1、没有扩增产物或量少:保证每一管的引物,buffer,酶等已全部加入;使用高质量的引物,并检测引物是否降解;确认模板的质量及浓度;适度提高缺失(或低产)条带对应的引物用量;确保预混体系已混匀彻底;
2、存在非特异性扩增:检查单对引物的扩增性能与特异性;检查酶用量是否过多,酌情减少酶的用量;降低模板使用量;
3、电泳时条带模糊:检查引物是否出现质量问题,比如降解;减少起始模板量;降低电泳电压,更换新的电泳缓冲液。

储存条件:-20℃


联系方式
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