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产地 | 中国/上海 |
品牌 | 上海联迈生物工程有限公司 |
货号 | LM-0023 |
保存条件 | 4℃保存 |
英文名称 | Hot Start Taq DNA Polymerase |
CAS编号 | |
保质期 | 一年 |
热启动Taq DNA聚合酶
中文名称:
热启动Taq DNA聚合酶
英文名称:
Hot Start Taq DNA Polymerase
热启动Taq DNA聚合酶产品规格:
250U
发货周期:
1~3天
热启动Taq DNA聚合酶
??本制品是Taq酶经特殊工艺处理后的制品,经处理后的Taq酶在加热至高温前,其聚合酶活性被抑制,从而抑制低温条件下由引物的非 特异性退火或引物二聚体引起的非特异性扩增(图例二)。本制品适 用于高特异性PCR反应、Multiplex PCR、高GC含量(>60%),有二 级结构等有较强背景的基因组扩增和大规模基因组扩增检测。产品特点:
1、简便:与目前通用的*的热启动酶反应条件一致,不需要改变PCR程序。
2、高效:有效减少了杂带及拖带产生,从而实现高特异性的PCR。
3、灵敏:可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出特定基因片段。(图例一)
产品用途:
1、高特异性PCR反应;
2、复杂模板扩增;
3、Multiplex PCR;
4、基因组扩增检测;
5、荧光定量PCR;
使用建议:
1、使用本试剂扩增得到的PCR产物3′ 端有一突出"A"碱基,可直接克 隆于T-vector中。
2、当扩增较长片段时,推荐使用HotStart Taq plus,该酶对于较长的DNA片段扩增具有更高的扩增效率及保真度。
应用实例:
图例一) 50μl扩增体系中,以50ng人基因组DNA为模板,HotStart Taq可对特定基因(170bp)进行高特异性扩增。
泳道M:DNA Ladder 2000; 泳道1、2:Taq酶 1.25U; 泳道3、4: Hot Start Taq酶 1.25U
图例二)热启动效果检测。左 1-6:94度10分钟热激活后,目的基因扩增;
右1-6:无热激活步骤直接 PCR。PCR扩增条件:94度5秒->57 度20秒->72度20秒,25个循环。结 论:未做热激活时,Taq酶活性被完 全抑制。(1-6酶用量分别为5U,2.5U,1.25U,0.625U,0.312U,0.156U)
常用反应体系(50μl)
质量保证:经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一 的目的条带;PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,无核酸内、外切酶污染。
活性定义:热激活后,在74℃条件下,30分钟内催化10nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量为一个单位。
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