Phi29 DNA聚合酶

中文名称：

Phi29 DNA聚合酶

英文名称：

Phi29 DNA Polymerase

Phi29 DNA聚合酶产品规格：

125U

发货周期：

1～3天

Phi29 DNA聚合酶

??本酶是从Bacillus subtilis噬菌体Phi29中克隆出的嗜温DNA聚合酶，利用基因重组技术，在大肠杆菌中进行表达后经多次纯化分离而得。Phi29 DNA聚合酶具有高效的DNA合成能力，可连续合成多达70kb的DNA片段。同时该酶具有3′→5′外切酶校读功能，保真性高，还具有特殊的链置换和连续合成特性。
产品组成：

产品特点：
1、极高的掺入率。
2、超强的链置换能力。
3、保真性高。
4、中温下反应。

产品用途：
1、恒温protein-primed DNA扩增。
2、利用随机引物扩增DNA。
3、滚环复制。
4、复制extended-region。

注意事项：
1、该酶缓冲液中含有还原剂DTT以便保证其*酶活性。故如果缓冲液不新鲜或经过反复冻融，使用前应添加4mM的DTT。
2、要求高扩增效率的反应，请选择百奥莱博蛋白质工程改造的升级版super phi29 DNA 聚合酶（JN0019）。

应用：菌液测序模板制备
优点：无需细菌培养、收集、裂解和质粒DNA的分离与纯化，不需要离心机和PCR仪。
样品预变性：挑取单克隆，参考右侧反应体系热变性。
质粒扩增：按下面反应条件进行，如选用百奥莱博super phi29 DNA 聚合酶（JN0019）反应时间可缩短到1小时*
热失活：65℃，10分钟。
测序反应：取上述反应液2μl加8μl双蒸水，即可用于直接测序。

常用反应体系（50μl）

质量保证：经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带；PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶污染。

活性定义：在30℃条件下，10min内能使0.5 pmol的dNTP掺入酸不溶性物所需要的酶量定义为1个活性单位。

10×反应缓冲液：500mM Tris-HCl（pH 7.5）, 100mM MgCl2，100mM (NH4)2SO4，40mM DTT。反应时需要加入dNTP。

储存条件：-20℃

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