上海联迈生物工程有限公司
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2×Fast Pfu PCR MasterMix
  • 品牌:上海联迈生物工程有限公司
  • 产地:中国/上海
  • 货号:LM-0043
  • 发布日期: 2019-01-21
  • 更新日期: 2025-09-19
产品详请
产地 中国/上海
品牌 上海联迈生物工程有限公司
货号 LM-0043
保存条件 4℃保存
英文名称
CAS编号
保质期 一年

2×Fast Pfu PCR MasterMix

中文名称:

2×Fast Pfu PCR MasterMix

英文名称:

2×Fast Pfu PCR MasterMix产品规格:

1ml

发货周期:

1~3天

2×Fast Pfu PCR MasterMix

??本制品是将PCR反应所需的Fast Pfu酶、dNTP、MgCl2、反应缓冲液以及优化剂以及稳定剂,预先配制成2倍浓度的混合物。2×Fast Pfu PCR MasterMix专为扩增克隆DNA片段优化,高保真,错误率仅为1.3x10-6。使用时只需在加入模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应,非常方便。较普通Pfu酶,2×Fast Pfu PCR MasterMix具有快速、高灵敏度、抗干扰能力强等特点,能获得更理想的扩增结果,并大幅度缩短扩增反应时间。
本制品用于要求保真度比较高的PCR反应,包括克隆PCR、DNA片段拼接、引入突变、全基因合成等。
产品特点
高保真:具有同Pfu酶相同的保真度,为普通Taq酶的10倍。
快速:Fast Pfu扩增速度为普通Pfu酶的数倍,72℃保温30秒可延伸1kb以上。
灵敏:可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出特定基因片段
快捷:PCR反应所必需试剂全集于一管之中,数分钟即可完成反应体系配制。
便利:10μl,25μl或50μl体系全部适用。

使用建议
Fast Pfu DNA聚合酶产生的PCR产物为平滑末端,无3′端"A"突出,其PCR产物的克隆有两种方案:
1、PCR前引物进行5′端加磷修饰或将PCR产物磷酸化处理后再直接克隆于平滑末端的载体中。
2、将产物3′末端加A后再与T载体连接。
由于Fast Pfu DNA聚合酶的校对活性可引起引物从3′端被部分降解。因此在设计引物时应适当增加引物的长度,理想的引物长度为20-30bp 碱基。另外为了减少由3′- 5′外切酶活性引起的引物降解,尽量在冰上配制反应体系。

常用反应体系(50μl):

组分体积
2×PCR MasterMix*25μl
上游引物0.2-1.0μM(终浓度)
下游引物0.2-1.0μM(终浓度)
dNTP(各10mM)1.0μl
模板1-50ng(质粒)
10ng-1μg(基因组)
ddH2O至50μl
*Mg2+终浓度为2mM



常用PCR循环

当扩增片段<3K:
94℃1分钟30秒
30次循环94℃,30秒
57℃,30秒
72℃ 根据产物长度调整, 30秒/kb
72℃5分钟
4℃保温
当扩增片段≥3K(推荐引物长度≥30bp):
94℃1分钟30秒
30次循环94℃,5秒
68℃ 根据产物长度调整,30秒/kb
72℃5分钟
4℃保温



PCR MasterMix选购指南:

编号产品名称特点
适用于菌落鉴定、菌液鉴定及常规PCR鉴定实验的Mix系列
JN00302×Taq PCR MasterMix高性价比PCR Mix,使用简便,扩增灵敏度高
JN00342×Complex Taq PCR MasterMixJN0030改进版,性能更均衡,适用面更广
JN00402×Fast Taq PCR MasterMix最快速的PCR试剂,常规PCR鉴定45分钟内知道结果
JN00352×RoomTop Taq PCR MasterMix可放在手边的PCR试剂,室温稳定存放60天
JN00362×RoomTop Fast Taq PCR MasterMix室温稳定存放60天,高速PCR试剂,常规PCR鉴定45分钟内知道结果
适用于一些较难扩增的PCR条带的鉴定及短片段克隆
JN00322×Taq Plus PCR MasterMix扩增效率更高及较好的保真度
JN00382×Hot Start Taq PCR MasterMix采用热启动Taq,可获得很好的特异性
JN00412×Ultra Taq PCR MasterMix高速扩增酶,优化配方,解决PCR扩增难题的,灵敏度高
高保真酶试剂,适用于长片段基因克隆
JN00312×Pfu PCR MasterMix采用高保真酶,适用于基因克隆
JN00432×Fast Pfu PCR MasterMix采用改良型高保真酶,更好的扩增效果,4倍扩增速度;扩增迅速
防止PCR产物二次污染、极高检测灵敏度的PCR试剂
JN00472×PCR MasterMix(防污染)采用dUTP/UDG酶系统,从根本上杜绝PCR产物二次污染
JN00332×Genotyping PCR Kit(nomal)极高检测灵敏度,可达到普通PCR试剂102至104倍扩增灵敏度



PCR MasterMix性能对比表:

名称编号扩增时间扩增长度是否有3'-A基因组扩增
2×Taq PCR MasterMixJN00301min/kb≤8kb+
2×RoomTop Taq PCR MasterMixJN00351min/kb≤8kb++
2×Complex Taq PCR MasterMixJN00341min/kb≤8kb+
2×Fast Taq PCR MasterMixJN004015s/kb≤8kb+
2×RoomTop Fast Taq PCR MasterMixJN003615s/kb≤8kb++
2×Ultra Taq PCR MasterMixJN004115s/kb≤8kb+++
2×Taq Plus PCR MasterMixJN00321min/kb≤20kb++++
2×Ultra Taq Plus PCR MasterMixJN004215s/kb≤30kb++++
2×Hot Start Taq PCR MasterMixJN00381min/kb≤8kb++++
2×Hot Start Taq Plus PCR MasterMixJN00391min/kb≤20kb++++
2×Pfu PCR MasterMixJN00311min/kb≤6kb×+
2×Fast Pfu PCR MasterMixJN004330min/kb≤12kb×+
2×SYBR Green Realtime PCR MasterMixJN00491min/kb≤8kb++
2×Genotyping PCR Kit(Normal)JN00331min/kb≤8kb+++++
2×Genotyping PCR Kit(Fast)JN004415s/kb≤8kb+++++
2×PCR MasterMix(防污染)JN00471min/kb≤8kb+


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