上海联迈生物工程有限公司
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血液直接PCR扩增试剂盒
  • 品牌:上海联迈生物工程有限公司
  • 产地:中国/上海
  • 货号:LM-0120
  • 发布日期: 2019-01-17
  • 更新日期: 2025-09-19
产品详请
产地 中国/上海
品牌 上海联迈生物工程有限公司
货号 LM-0120
保存条件 4℃保存
英文名称 Blood Direct PCR Kit
CAS编号
保质期 一年

血液直接PCR扩增试剂盒

中文名称:

血液直接PCR扩增试剂盒

英文名称:

Blood Direct PCR Kit

血液直接PCR扩增试剂盒产品规格:

50μl×40次|50μl×200次

发货周期:

1~3天

血液直接PCR扩增试剂盒

??本试剂盒是由热启动酶、PCR Buffer、dNTPs、Mg2+以及PCR稳定剂和增强剂等组成的预混体系,本产品使用简便,无需事先提纯可直接用血液为模板扩增目的基因,可有效扩增高GC含量的模板和引物。
试剂盒组成

组份50μl×40次50μl×200次
2×Blood Direct PCR Mix1ml5×1ml
ddH2O1ml5×1ml



注意事项:建议使用时添加≤10%的全血为模板,加上血液后用涡旋器将管中各组分轻轻混匀。

使用方法
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂50μl反应体系20μl反应体系
2×Blood Direct PCR Mix25μl10μl
Forward Primer,10μM1μl0.4μl
Reverse Primer,10μM1μl0.4μl
Template Blood0.5-5μl0.25-2μl
ddH2Oup to 50μlup to 20μl


注意:引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。

2、PCR反应条件

步骤温度时间循环数
预变性94℃2 min
变性94℃30 s35-40个循环
退火55-60℃30 s
延伸72℃30-60 s
终延伸72℃5 min


注意:
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定,本产品中所含热启动酶的扩增效率为1-2 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。

储存条件:-20℃,避免反复冻融。


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