上海联迈生物工程有限公司
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Taq DNA Polymerase
  • 品牌:上海联迈生物工程有限公司
  • 产地:中国/上海
  • 货号:LM-0101
  • 发布日期: 2019-01-17
  • 更新日期: 2025-09-19
产品详请
产地 中国/上海
品牌 上海联迈生物工程有限公司
货号 LM-0101
保存条件 4℃保存
英文名称 Taq DNA Polymerase
CAS编号
保质期 一年

Taq DNA Polymerase

中文名称:

Taq DNA Polymerase

英文名称:

Taq DNA Polymerase

Taq DNA Polymerase产品规格:

500U|2500U|10000U

发货周期:

1~3天

Taq DNA Polymerase

??Taq DNA Polymerase是通过大肠杆菌表达纯化的重组酶。其基因来源于Thermus aquaticus polymerase。该蛋白分子量为94 kDa,具有5'→3'DNA聚合酶活性和5'→3'外切核酸酶活性,无3'→5'外切核酸酶活性,扩增得到的PCR产物3'端附有一个“A”碱基,因此可直接用于T/A克隆。本产品具有延伸速度快、扩增效率高的特点,主要适用于PCR法扩增DNA片段、DNA序列测定等实验。
产品组成

组份500 U2500 U10000 U
Taq DNA Polymerase(5 U/μl)100μl5×100μl2×1ml
10×PCR Buffer1.8ml5×1.8ml8×5ml



活性定义:用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在74℃,30分钟内,将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸性不溶物质所需的酶量定义为1个活性单位(U)。

质量控制
1、经过多次柱纯化,SDS-PAGE检测其纯度大于99%;
2、经检测无外源核酸酶活性;
3、PCR方法检测无宿主残余DNA;
4、能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因;
5、室温存放一个月,无明显活性改变。

使用方法
以下举例为以人基因组DNA为模板,扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系:

试剂50μl反应体系终浓度
10×PCR Buffer5μl
dNTP Mix,10 mM each1μl200μM each
Forward Primer,10μM2μl0.4μM
Reverse Primer,10μM2μl0.4μM
Template DNA<0.5μg<0.5μg/50μl
Taq DNA Polymerase0.25-0.5μl1.25-2.5 U/50μl
ddH2Oup to 50μl


注意:引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。

2、PCR反应条件:

步骤温度时间循环数
预变性94℃2min
变性94℃30s25-35个循环
退火55-65℃30s
延伸72℃30s
终延伸72℃2min



注意:
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定,本产品Taq DNA Polymerase的扩增效率为2 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。

储存条件:-20℃,避免反复冻融。

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