新型植物基因组DNA提取试剂盒

中文名称：

新型植物基因组DNA提取试剂盒

英文名称：

NewPurify Plant Genomic DNA Extraction Kit

新型植物基因组DNA提取试剂盒产品规格：

50次|200次

发货周期：

1～3天

新型植物基因组DNA提取试剂盒

??本试剂盒采用高效、专一结合核酸的离心吸附柱和独特的缓冲系统，适合从各种不同的植物新鲜或冻存组织中提取基因组DNA，并可*限度地去除植物组织中的杂质。本试剂盒无需使用酚/氯仿抽提，操作安全。提取的基因组DNA片段大、纯度高、质量稳定可靠，适用于PCR、荧光定量PCR、分子标记、文库构建等实验。
试剂盒组成：

自备试剂：无水乙醇

实验前准备及重要注意事项：
1、样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。
2、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer LP3和Buffer GW2中加入无水乙醇。使用前请检查Buffer LP1和Buffer LP2是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀，请将Buffer LP1和Buffer LP2于56℃水浴重新溶解。

新型植物基因组DNA提取试剂盒操作步骤：
1、取植物新鲜组织100 mg左右或干重组织约20 mg，加入液氮充分研磨。
2、将研磨后的粉末收集到离心管(自备)中，加入400μl Buffer LP1和6μl RNase A(10 mg/ml)，涡旋振荡1分钟，室温放置10分钟，使其充分裂解。
注意：
1)使用涡旋振荡或移液器吹打，充分裂解组织，组织裂解不完全会影响最终的DNA得率。
2)请勿在使用前将Buffer LP1与RNase A混合。
3、加入130μl Buffer LP2，混匀，涡旋震荡1分钟。
4、12000rpm(~～13400×g)离心5分钟，将上清移至新的离心管(自备)中。
5、加入1.5倍体积的Buffer LP3(使用前检查是否已加入无水乙醇)，充分混匀(如500μl滤液加入750μl Buffer LP3)。
注意：加入Buffer LP3后应立即混匀，可能会产生沉淀但不影响后续实验。
6、将上步所得溶液和沉淀全部加入到已装入收集管的吸附柱DM中，若一次不能加完溶液，可分多次转入。12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
注意：如吸附膜呈现绿色，向吸附柱中加入500μl无水乙醇，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
8、重复步骤7.
9、12000rpm离心2分钟，倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR 等)。
10、将吸附柱放到一个新离心管(自备)中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50-100μl Buffer GE或灭菌水，室温放置2-5分钟，12000rpm离心1分钟，收集DNA溶液。-20℃保存DNA。
注意：
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感，可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响，若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围)，pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。
3)如果要提高DNA的终浓度，可以将步骤10所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上，重复步骤10；若洗脱体积小于100μl，可以增加DNA的终浓度，但可能会减少DNA的总产量。如果所得DNA的量小于1μg，推荐用50μl Buffer GE进行洗脱。
4)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响，如需长期保存，推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。

储存条件：室温(15～30℃)。