内毒素清除试剂盒

中文名称：

内毒素清除试剂盒

英文名称：

Endotoxin removing Kit

内毒素清除试剂盒产品规格：

1.5mL

发货周期：

1～3天

内毒素清除试剂盒

本试剂盒使用的是一类高效内毒素清除树脂，它以修饰过的多粘菌素B(PMB)为配体，进行特异性的内毒素清除。经此专用亲和介质纯化，样品最终的内毒素水平可低于0.1 EU/mL。
细菌内毒素(脂多糖，LPS)是革兰氏阴性细菌细胞壁的主要成分。人们在研究革兰氏阴性菌血症和内毒素血症的过程中，发现细菌内毒素在其中起着关键的作用，内毒素使机体免疫功能严重受损，进一步的发展可能引发脓毒性休克，弥散性血管内凝血，急性呼吸窘迫综合症，全身炎症反应综合症或致命性多器官功能衰竭。因此，内毒素的清除对于人类疾病治疗的注射型药品、生物制品等都是必须的，尤其对于基因药物、蛋白药物、单抗克隆药物、治疗性疫苗、小分子化学药物等生物制品的下游纯化处理来说就显得非常重要。

内毒素清除试剂盒试剂盒特点：
1.高稳定性，高去除效率。
2.高结合力：> 2000,000 EU/mL。
3. pH范围为5-10时，亲和介质对内毒素的清除率在92%以上；pH值在7-8时，清除效率*。
4. 无需恒流泵即可调节流速。
5. 重复使用 5次不会改变柱子效果。
6. 使用方便，试剂盒中提供无热原缓冲液，无热原收集管及无热原枪头等。
7.适合纯化对象为蛋白，多肽，抗体，多糖等。
8.可耐受试剂：20% DMSO，20% 乙醇，20% 甘油;1 M 尿素，300mM咪唑; 0.05% 吐温-20，10mM DTT等。

试剂盒组成：

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1.样品处理：样品的pH值和离子强度在内毒素去除的过程中起着重要作用。虽然结合内毒素的pH范围在6-9，但是7-8的pH范围是纯化的*范围。合适的离子浓度可以降低非特异性吸附，0.15-0.5 M NaCl的条件可以得到一个很好的去除效率和低的样品损失。所以，纯化之前可以使用处理过的氯化钠，0.1 M的氢氧化钠或0.1 M盐酸来调节离子强度或pH值。
2.活化亲和介质：将预装柱置于铁架台，垂直固定，去除预装柱顶部的盖子，打开流速控制器，使保护液在重力作用下流干，加入5mL的(预冷)再生缓冲液，调节流速控制器，保持流速在0.25mL/min(或者10滴/min)，待再生缓冲液流干，再加入5mL 再生缓冲液，再重复操作两次，确保体系保持无热原(即内毒素)存在。即使是第一次使用也必须进行这一步操作。这步操作大约需要60分钟完成。
3. 平衡亲和介质：活化完毕后，加入6mL的(预冷)平衡缓冲液，调节流速控制器，保持流速在0.5mL/min，流干平衡缓冲液，再按此操作重复两次。这步操作大约需要40分钟完成。
4.内毒素清除：将流速控制器关闭，使用无热原枪头将样品加入，打开控制器，控制流速不高于0.25mL/min，流出液体积达到1.5mL后，使用无热原接收管接受样品，样品流干后，再加入1.5mL-3.0mL的(预冷)平衡缓冲液淋洗，收集淋洗液。检测样品浓度及内毒素水平。
5. 再次使用：如果流出样品内毒素水平未能达到预期值，需要将预装柱重新再生，按照步骤1 重新再生，然后上样纯化。
6. 储存条件：如果预装柱用完后需要保存，先用10mL 平衡缓冲液平衡柱子，待平衡液流干，加入1.5mL的再生缓冲液(含0.02%的叠氮化钠)。

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