柱式植物DNA提取试剂盒

中文名称：

柱式植物DNA提取试剂盒

英文名称：

Plant DNA column extraction kit

产品规格：

50次

发货周期：

1～3天

柱式植物DNA提取试剂盒

本试剂盒是在植物DNA提取试剂盒基础上开发的柱式植物基因组DNA提取产品，可以用于多种植物基因组DNA(含叶绿体和线粒体DNA)的快速提取。
产品特点：
1. 纯度高，不含污染和抑制剂，可以直接用于酶切、PCR、real-time PCR、mμLtiplex PCR、RAPD、RFLP、AFLP、Southern Blotting，microsatellite analysis等各种后续分子生物学实验。
2.产率一般在3-30μg/100mg样品。OD260/280一般在1.8以上。DNA片段长度一般在40-50 Kb左右。
3.适用范围广，可以使用于绝大多数植物的各种组织。
4. 不会发生离心柱堵塞现象。

柱式植物DNA提取试剂盒试剂盒组成：

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

柱式植物DNA提取试剂盒使用方法：
注意：溶液A和溶液B容易产生沉淀，溶液B比较粘稠，用前均需要放置在65℃预热使沉淀溶解、粘稠度降低，用前充分摇匀。

1. 65℃预热柱式植物DNA提取试剂盒溶液A，待其沉淀溶化后，充分混匀，取0.75mL加入到10mL塑料离心管中并放置于65℃待用。
2. 称取植物组织0.1-0.5 g左右，剪成微小的碎片，加入到有溶液A的10mL塑料离心管中并短暂匀浆。也可以液氮研磨后将粉末加入到管中(建议不要在陶器或玻璃研钵中破碎细胞，因为二氧化硅会非特异地吸附DNA，降低DNA 回收量。但可以在塑料研钵中研磨)。匀浆过程中将产生大量泡沫，属于正常现象。
3. 将匀浆液(包括植物碎片)全部转移到新的1.5mL塑料离心管(此时匀浆液较为粘稠，可将枪头剪去一截后转移上清，不能吸取的植物碎片可以小心倒入)。
4.在匀浆液中加入0.5倍体积预热的溶液B到离心管中，颠倒数次混匀。此时溶液中可能有白色丝状悬浮物产生。(由于溶液B比较粘稠，可以将1mL枪头剪去一截再吸取)。
5. 65℃水浴3～5分钟。如果室温放置，DNA产量会降低10-20%。
6. 加入200μl自备氯仿，震荡混匀10-30秒，此时溶液将呈乳白色。
7. 12000rpm室温离心2分钟。此时上清液将变得透明，中间层有白膜。小心转移上清液到一个新的1.5mL塑料离心管中，避免触及中间层的白膜。
8. 加入1.5倍体积的溶液C，颠倒混匀后全部转移到离心吸附柱中，室温放置至少2分钟。
9. 12000rpm室温离心1分钟，DNA 将吸附在离心吸附柱的膜上，倒弃收集管中的穿透液。
10. 将0.5mL通用洗柱液加入离心柱中，12000rpm室温离心1分钟，弃穿透液。
11. 重复上步操作一次。
12. 空甩半分钟去除残留液体,将离心吸附柱转移到新的1.5mL离心管中。
13. 将离心吸附柱放置在一新的1.5mL塑料离心管中，加50-100μL DNA 洗脱液2.0，室温放置3～5分钟。
14. 12000rpm室温离心1分钟即得植物DNA溶液。
15. 由于本产品使用的离心吸附柱吸附DNA的能力较强，可以重复上步操作一次，以洗脱得到更多的DNA。
16. 直接取5-10μL电泳检测DNA，其余放冰箱备用。

使用效果：

图注：用本产品提取0.1g牵牛花叶片基因组DNA，60μL洗脱液洗脱，取15μL检测。泳道3和4为本产品提取效果，泳道1和2为某公司同类产品提取效果。本公司提取的牵牛花叶片基因组DNA 条带清晰，产量高。M为本公司Marker，染料为本公司绿如蓝核酸染料(BTN70909)。