柱式冻存血液DNA提取试剂盒

中文名称：

柱式冻存血液DNA提取试剂盒

英文名称：

Frozen blood DNA column extraction kit

产品规格：

50次

发货周期：

1～3天

柱式冻存血液DNA提取试剂盒

血液DNA是重要的研究材料，但是血液DNA在常温下存放的时间很短，因此很多血液样品都是冻凝存放。由于冻存过程中形成的冰晶会刺破细胞膜，释放出DNA，因此从冻存血液中高效提取DNA一直是个棘手的问题。本产品就是北京我公司开发的专门用于从冻存血液中提取DNA的试剂盒。
产品特点：
1.适用于各种动物血液，包括禽类和昆虫。
2. 微量提取，每次可处理400μL 血液。
3. DNA 完整性好，纯化后长度在20-50 Kb 之间。
4. DNA 纯净，OD260/OD280在1.8-2.0 之间，可直接用于PCR、酶切、杂交等实验。DNA产量一般在10μg/mL 血液。
5. 操作简单，整个过程约20分钟，室温操作，适合大规模样品处理。

柱式冻存血液DNA提取试剂盒试剂盒组成：

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。
柱式冻存血液DNA提取试剂盒使用方法：
1.从-20℃或更低的冰箱中取出血液样品，室温下静置融化。
2. 将400μL 解冻的血液转移到一个1.5mL的塑料离心管中，加入400μL溶液A，充分震荡混匀。如果是禽类血液，则少加10倍，只加40μL。
3.在混合液中加入400μL溶液B和200μL 氯仿(自备)，振荡1分钟。由于离心管比较满，所以需要确保管底溶液转动起来，否则只是液面振动而已。
4. 4℃12000 g离心10分钟，小心将上清转移至一新的1.5mL塑料离心管
中。注意：*不要室温离心，如果室温离心，则离心后部分样品的中间白色层可能会很厚，只能得到很少的上清。
5. 将约0.7-0.8mL上清转移到10-15mL塑料离心管中(不要使用玻璃离心管，否则DNA 会吸附到管壁上。常用的培养提质粒用的细菌的培养管即可)。
6. 加入2.5倍上清体积的溶液C(2mL)，立即摇晃混匀。
7. 将混合液分多次转移到离心吸附柱中，每次0.7mL左右，转移后静置2-5分钟，以使DNA与膜充分结合，然后室温12000 g离心30秒，弃收集管中的废液，然后再加入0.7mL，重复上述操作，直到全部混合液挂柱。
8.在离心吸附柱中加入0.7mL 通用洗柱液，室温12000 g离心30秒，弃收集管中的废液。
9.在离心吸附柱中再加入0.3mL 通用洗柱液，室温12000 g离心30秒，弃收集管中的废液。
10.室温12000 g离心30秒，去尽残留液体(此步骤十分重要，不要省略，否则残留的含乙醇的通用洗柱液将抑制后续的酶反应)。
11. 将离心吸附柱置于一新的1.5mL塑料离心管中，加入50μL DNA 洗脱液2.0，室温放置2分钟。如果将DNA 洗脱液2.0在65℃预热后再使用，洗脱DNA的效果更佳。
12.室温12000 g离心30秒，离心管底部溶液即DNA溶液，可立即使用或-20℃长期保存。
13. 本产品所用离心吸附柱吸附能力比较强，如果再次用DNA 洗脱液2.0洗脱，还能洗脱下一些血液DNA。

疑难解答：
Q：保存血液样品时温度越低越好吗？
A：不是。Tegelstrom 曾经比较了分别在-70℃，-20℃，4℃保存了6个月的蛙血，发现保存温度越低，血液DNA的断裂越严重。
Q：本产品是否可以用于放量操作？
A：可以在大的离心管中进行放量操作，如每次处理5-100mL 血液，只是客户需要单独购买红细胞裂解液，并按比例增加溶液A和溶液B的用量。
Q：冷冻血液为何DNA产量很低？
A：冷冻过程中形成的冰晶刺破了细胞膜和细胞核膜，红细胞裂解液处理时释放的DNA将进入上清并丢失，所以*得到的DNA是没有被冰晶刺破的细胞的DNA。

首页 ?|? 关于我们 ?|? 联系我们 ?|? 在线咨询 ?|? 网站地图