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- 品牌:上海联迈生物工程有限公司
- 产地:中国/上海
- 货号:LM-0010
- 发布日期: 2018-12-27
- 更新日期: 2024-04-30
产地 | 中国/上海 |
品牌 | 上海联迈生物工程有限公司 |
货号 | LM-0010 |
保存条件 | 4℃保存 |
英文名称 | TRIzol Reagent |
保质期 | 一年 |
TRIzol试剂
中文名称:
TRIzol试剂
英文名称:
TRIzol Reagent
产品规格:
100ml
发货周期:
1~3天
TRIzol试剂
TRIzol Reagent是一种可用于提取动植物和细菌来源的组织或细胞RNA的制品。样本在进行匀浆的过程中,TRIzol Reagent能够充分破坏细胞,裂解细胞内含物,同时可高效抑制RNA酶的活性,从而保持RNA的完整性。TRIzol Reagent具有很强的广谱性,可以适用于各种样品的总RNA提取,提取过程方便快速,整个操作在一小时内便可以完成。该试剂可用于小量样品(20-100mg组织、1×10?细胞)也适用于大量样品(≥1g组织、>10?细胞);对人、动物、植物组织、细菌均适用,可同时处理大量不同样品,整个提取过程在一小时内即可完成。分离的总RNA无蛋白质和DNA污染,可用于Northern Blot、Dot blot、ployA筛选、体外翻译、RNase保护分析和基因克隆。
样本量及 RNA 产量:
储存:2-8℃避光保存,可保存 2 年。
注意:该试剂含有强变性剂,请勿直接于皮肤接触或吞咽,若接触到皮肤或眼睛请尽快到医院处理。实验时务必穿实验服,戴手套。
自备试剂:氯仿,异丙醇,70%乙醇(DEPC 水配置),RNase-Free H2O。
TRIzol试剂操作方法:
一、实验前准备:
RNA 制备的关键是要抑制细胞中的RNA 分解酶和防止所用器具及试剂中的RNA 分解酶的污染。因此,在实验中必须采取以下措施:戴一次性干净手套;使用RNA 操作专用实验台;在操作过程中避免讲话等等。通过以上办法可以防止实验者的汗液、唾液中的RNA 分解酶的污染。
注意事项:
1. 尽量使用一次性塑料器皿,若用玻璃器皿,应在使用前用0.1%DEPC 水溶液在37℃处理 12h,然后在120℃高压灭30分钟 以除去残留的DEPC。
2. 用于 RNA 实验的试剂,须使用干热灭菌(180℃,60min)或使用上述方法进行 DEPC 水处理灭菌后的玻璃容器盛装(也可以使用RNA 实验用的一次性塑料容器),使用的无菌水须用0.1%的DEPC 处理后再进行高温高压灭菌。
3. RNA 实验用的试剂和无菌水都应专用,避免混用后交叉污染。
TRIzol试剂二、实验操作:
TRIzol Reagent的使用量情况如下:
TRIzol 使用方法:
常见问题分析:
1.抽提率低。
? 可能原因:
? a. 样品裂解或匀浆处理不彻底;
? b. RNA 沉淀未完全溶解。
2.A260/A280<1.65。
? 可能原因:
? a. 检测吸光度时,RNA 样品没有溶于水,而溶于了TE中;
? b.样品匀浆时加的组织量过多;
? c.分层后,吸取上清液不足 500μl;
? d.吸取水相时混入了有机相。
3.DNA 污染过多。
? 可能原因:
? a. 样品匀浆时加的试剂量太少或组织量过多;
? b. 样品中含有有机溶剂。
? 解决方法:使用该试剂通常基因组DNA 污染含量<0.1ng/μl,如需要彻底去除DNA的污染,请使用Rnase-Free DNase I(货号:A3001)消化去除基因组DNA 污染。如使用cDNA 第一链反转录试剂盒(含基因组去除剂)(货号:MT0015)则无需提前消化去除基因组DNA 污染,该试剂盒中包含了去除基因组DNA 污染的试剂。