柱式病毒RNA提取试剂盒2.0

中文名称：

柱式病毒RNA提取试剂盒2.0

英文名称：

Column Virial RNA Isolation Kit 2.0

产品规格：

50次

发货周期：

1～3天

柱式病毒RNA提取试剂盒2.0

本产品是在百奥莱博柱式病毒RNA提取试剂盒（货号：BTN71001）的基础上开发的、专门用于从血清(血浆)或其他液体样品中提取微量病毒RNA的升级产品。
柱式病毒RNA提取试剂盒2.0产品特点：
1. 操作简单，整个过程只需要20分钟左右。
2.不需要额外在洗柱液中补加乙醇。 
3. 灵敏度高，通过RT-PCR检测到的最终灵敏度低于50拷贝/mL，比柱式病毒RNA提取试剂盒更高。
4. 安全无毒，不需要使用苯酚和氯仿等有机溶液。
5. 如果加上病毒离心富集步骤，最多可以处理1.5mL液体病毒样品。
6. 与RT-PCR和荧光RT-PCR兼容。
7. 价廉物美，性价比远低于国外同类产品。
8. 适用于各种材料，包括血清、血浆、脑脊液、尿液、粪便、培养细胞上清液等无细胞材料。

产品组成：

保存条件：室温保存，有效期一年。
柱式病毒RNA提取试剂盒2.0使用方法：
1. 在1.5mL离心管中加入0.2mL液体病毒样品(如血清、血浆、脑脊液、尿液、粪便、培养细胞上清液等)。如果病毒需要富集，可以将1.5mL液体在4℃下24000g冷冻离心60分钟，移弃1.3mL后继续操作。 
2. 加入0.6mL RNA病毒裂解液，振荡30秒混匀后室温放置10分钟。
? 注意：RNA病毒裂解液在4℃放置后可能会产生沉淀，使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。 
3. 加入0.6mL柱式病毒RNA提取试剂盒溶液B，颠倒混匀。此时离心管中混合液的总体积是1.4mL。 
4. 将0.7mL混合液将转移到离心吸附柱中，室温放置2分钟。
5. 13000g室温离心1分钟，弃收集管中穿透液。 
6. 再将剩余的0.7mL混合液将转移到离心吸附柱中，室温放置2分钟。
7. 13000g室温离心1分钟，弃收集管中穿透液。
8. 加入0.7mL通用洗柱液到离心吸附柱中，13000 g室温离心1分钟，弃收集管中穿透液。 
9. 13000g室温离心半分钟。 
10. 在离心吸附柱的滤膜的中部加入30μl RNA洗脱液，然后将离心吸附柱套入一新的1.5mL离心管中，室温放置2分钟。
11. 13000g室温离心1分钟，离心管中收集的样品即为RNA溶液。
12. RNA样品可以直接用于RT-PCR或逆转录反应，也可放-80℃长期保存。 

疑难解答：

1.提取液体样品/病毒核酸(RNA或DNA)为何很难？
原因一是量少。病毒颗粒中的RNA或DNA是作为遗传物质保存，每个病毒最多只携带几个拷贝(而一个细胞中有上万种RNA分子，每种RNA有很多拷贝)，同时其长度也十分有限(一般不到细胞基因组的万分之一)，样品中病毒数往往又不是很多，使得样品中病毒核酸的*量往往比一个细胞中核酸的*量还少，所以操作中十分容易丢失。另外，由于得到的核酸*量很少，不能使用电泳和测OD检测，只能通过PCR或RT-PCR检测，而PCR或RT-PCR的条件又需要优化，所以要确定提取是否成功十分不容易。

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