植物miRNA提取试剂盒

中文名称：

植物miRNA提取试剂盒

英文名称：

Plant microRNA Extraction Kit

产品规格：

50次

发货周期：

1～3天

植物miRNA提取试剂盒

本试剂盒适用于快速提取植物microRNA或者microRNA/总RNA分别提取。采用分提取操作步骤也可单独纯化富集后的microRNA组分和总RNA（＞200 nt）从而得到分离富集的microRNA和RNA。试剂盒采用独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶，植物RNA助提剂帮助结合多糖多酚并通过离心去除，然后裂解混合物通过基因组DNA清除柱，基因组DNA被清除而RNA（包括microRNA）被选择性滤过。滤过的RNA用乙醇调节结合条件后，RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜， 再通过一系列特殊漂洗液快速的漂洗－离心的步骤,将细胞代谢物，蛋白等杂质去除， *低盐的RNase free H20将纯净RNA（包括microRNA）从硅基质膜上洗脱。
传统的microRNA提取试剂盒均是采用异硫氰酸胍/苯酚/氯仿（TRIzol法）加高浓度乙醇硅胶膜吸附小片段microRNA的原理方法制成，但是复杂的植物品类如棉花、葡萄、胡杨、冬青、月季、石斛、单参、水稻种子、人参、玉米胚芽等大量样品用TRIzol的原理甚至无法提取符合要求的总RNA，更不用说microRNA。世界*公司采用Trizol法原理的microRNA提取试剂盒面临复杂植物样品时束手无策，产品线中干脆就没有复杂植物microRNA提取试剂盒。用户无奈只好用传统方法，或者TRIzol法提取，用异丙醇/乙醇沉淀方法来提取microRNA，虽然也能提取到部分microRNA，但是沉淀法损失巨大或者和杂质共沉淀，影响实验结果，在国际刊物投稿时常常面临质疑，甚至论文被撤销。而本试剂盒在公司全球*数百种复杂植物提取的经验基础上（包括人参、雪莲、棉花、胡杨、冬青等各种复杂植物），创新性的采用了不用苯酚，氯仿的技术路线全球首家解决该问题，可以提取绝大多数复杂植物如棉花、杨树、冬青、月季、丹参等植物microRNA，当然本试剂盒也适用于拟南芥、水稻、小麦、烟草、水稻等各种简单样品。
植物miRNA提取试剂盒产品组分：
专用裂解液—————————50ml
植物RNA助提剂———————5ml
Wash Solution 1——————12ml
Wash Solution 2/3—————10ml
RNase-free H2O——————10ml
基因组DNA清除柱和收集管——50套
吸附柱和收集管———————50套

产品特点：
1. 完全不使用有毒的苯酚，氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。 
2. 快速，简捷，单个样品操作一般可在30分钟内完成。 
3. 独特的植物RNA助提剂可以有效结合多糖多酚,提高清除效果。 
4. 多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280典型的比值达1.9～2.0，可用于RT-PCR，Northern-blot和各种实验。
植物miRNA提取试剂盒注意事项：
1. 所有的离心步骤均可在室温完成（4℃离心也可以），使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 需要自备乙醇，β-巯基乙醇，研钵(可选)。
3. 样品处理量*不要超过基因组清除柱DA和和RNA吸附柱处理能力，否则造成DNA残留或产量降低。开始摸索实验条件时，如果不清楚样品DNA/RNA含量
时可使用较少的样品处理量，将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
4. 裂解液RLT Plus 和Wash Solution 1中含有刺激性化合物，操作时戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. 关于DNA 的微量残留：
一般说来任何总RNA提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA的微量残留（DNase消化也无法做到100%无残留），该产品由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA清除柱技术，绝大多数DNA已经被清除，个别特殊情况需要清除微量基因组DNA残留，可使用以下几种DNA酶消化的方式。
1) 传统DNA酶消化提取的RNA/microRNA，热灭活DNA酶后直接用于后续实验。
2) 传统DNA酶消化提取的RNA/microRNA，然后使用RNA清洁纯化试剂盒（但是需要将说明书改动一个地方，第二步加入250μl无水乙醇改成加入700μl无水乙醇)清洁纯化后用于后续实验。
3) 直接在吸附柱上进行DNase I柱上消化处理。购买DNA酶柱上消化试剂盒(但是需将说明书的去蛋白液RW1改成Wash Solution 1) 可先索取具体
操作说明书。
6. 碰到特别复杂多糖多酚，淀粉等次级代谢产物特别丰富的样品，如葡萄果实，水稻种子，裂解液RLT Plus效果不佳的情况下，应该购买专用裂解液CLB。裂解液CLB是本公司为特别复杂的多糖多酚植物样品研发的*配方，绝大部分裂解液RLT Plus无法提取的复杂样品都可以提取成功。

储存条件：室温，有效期6个月。

本制品别名：植物microRNA提取试剂盒|植物microRNA分离试剂盒|植物microRNA纯化试剂盒|植物miRNA分离试剂盒|植物miRNA纯化试剂盒|植物总RNA提取试剂盒||植物总RNA纯化试剂盒|植物总RNA/miRNA分离提取试剂盒