无RNase的DNase溶液

中文名称：

无RNase的DNase溶液

英文名称：

RNase-Free DNase Solution

产品规格：

500U

发货周期：

1～3天

无RNase的DNase溶液

本产品是从牛胰DNase中精制的无RNase污染的DNase，专门用于降解RNA样品中的DNA污染。
产品特点：
1.高效，能使总RNA中的基因组DNA污染降低到电泳检测不到的水平。
2. 同时降解单链DNA和双链DNA。
3. 不含RNase，可以保证RNA分子完整性不受任何影响。
4.反应条件经过优化，可以用于快速降解硅胶膜上吸附的DNA，也可以用于快速降解液体反应体系中的DNA。
5.可以用于总RNA提取和体外转录中去除DNA。也可用于切口平移(Nick Translation)和DNase印迹法研究DNA-蛋白质相互作用。

无RNase的DNase溶液产品组成：

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

无RNase的DNase溶液使用方法：

一、去除RNA样品中污染的基因组DNA(仅供参考，本试剂盒不含RNase-free DNase以外的所需试剂)
1.在一无RNA酶的离心管中配制50μl的反应液：

2. 混匀，短暂离心，37℃放置30分钟；
3. 加入2μl 50mM EDTA溶液，65℃放置15分钟。此步可以灭活DNase。RNA在加热时容易水解，也可以使用酚/氯仿抽提去除DNase，然后再乙醇沉淀RNA。如果RNA在20μg以上，也可以使用本公司的RNAadsorp
试剂盒进行柱式纯化，回收RNA。
4.电泳检测是否去除了基因组 DNA，然后进行后续实验。

二、除去硅胶膜离心吸附柱上的DNA(仅供参考，本试剂盒不含 RNase-free DNase以外的所需试剂)
1.在柱式法提取过程中，完成洗涤步骤。
2. 配制 50μl DNase工作液。

3. 加在离心吸附柱中间，室温放置5-30分钟。
4. 加入0.5mL自备洗柱液洗涤两次。
5. 用RNA洗脱液洗脱即得无DNA的RNA样品。

三、除去RNA体外转录反应中的DNA模板(仅参考，本试剂盒不含RNase-free DNase以外的所需试剂)
1. 按2 U RNase-free DNase/μg DNA模板的比例在RNA体外转录反应中加入RNase-free DNase。注意：酶的*用量也许需要优化。
2. 37℃放置15分钟。
3. 加入2μl 50mM EDTA溶液，65℃放置15分钟；此步可以灭活DNase。RNA在加热时容易水解，也可以使用酚/氯仿抽提去除DNase，然后再乙醇沉淀RNA。如果RNA在20μg以上，也可以使用本公司的RNAadsorp试剂盒(需另购)进行柱式纯化，回收RNA。

四、用于切口平移法(Nick Translation)DNA探针标记(仅供参考，本试剂盒不含RNase-free DNase以外的所需试剂)
1. 按下表设置切口平移标记反应：

注：稀释 RNase-free DNase的缓冲液为1×DNA聚合酶 I缓冲液：50mM
2. 15℃放置 15-60分钟。
3. 加入10μl 50mM EDTA溶液。
4. 65℃放置 15分钟灭活酶。
5. 所得探针可以纯化后使用，也可以直接使用。